研究背景急性咽炎是临床常见的多发病,其中由病毒引起的急性咽炎约占40～60%。银翘马勃散出自《温病条辨》,具有清热、解毒、利咽的功效。临床研究表明,银翘马勃散原方或加减方对上呼吸道感染、急性咽喉炎、手足口病等有较好的疗效,且方中的连翘、金银花等均含有抗病毒活性成分,有开发为治疗病毒性咽炎新药的潜在价值。而目前尚未见银翘马勃散治疗急性病毒性咽炎相关药效学研究的报道。研究目的1、银翘马勃散的质量控制研究。2、探究银翘马勃散体内外抗病毒的作用。3、探究银翘马勃散利咽、抗炎、镇痛、解热的作用。实验方法1银翘马勃散的质量控制研究1.1按2015版《药典》方法对连翘、金银花、牛蒡子、射干进行含量测定。1.2建立以HPLC法对银翘马勃散水提物中5种有效成分进行同时测定的方法。2银翘马勃散体内外抗病毒作用的研究2.1通过细胞实验,以MTT法探究银翘马勃散体外对HAdV3、CVB3和H1N1的抑制作用。2.2建立H1Ni感染小鼠模型,探究银翘马勃散体内抗HiN1的作用。3、银翘马勃散利咽、抗炎、镇痛、解热作用的研究3.1对急性咽炎模型大鼠的治疗作用3.2采用小鼠耳廓肿胀实验及小鼠足趾肿胀实验研究其抗炎作用3.3采用醋酸扭体实验和甲醛致痛实验研究其镇痛作用3.4采用LPS诱导大鼠发热模型研究其解热作用实验结果1 银翘马勃散的质量控制研究1.1连翘苷、连翘酯苷A、绿原酸、木犀草苷、牛蒡苷、次野鸢尾黄素6种成分的含量分别为0.320%,0.508%,2.880%,0.056%,6.110%,0.210%。1.2建立了HPLC法同时测定银翘马勃散水提物中5种有效成分含量的方法。2银翘马勃散体内外抗病毒作用的研究2.1银翘马勃散能剂量依赖性地显著降低3种病毒对细胞的感染率。2.2银翘马勃散能显著提高H1N1感染小鼠的生存天数,显著降低其肺指数,且能减轻其肺脏的病理损伤程度。3、银翘马勃散利咽、抗炎、镇痛、解热作用的研究3.1利咽作用银翘马勃散可明显减轻急性咽炎模型大鼠咽部粘膜的炎症表现,且对咽炎大鼠的白细胞计数结果和血清中TNF-α与IL-6的水平有显著影响。3.2抗炎作用银翘马勃散可明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓炎性肿胀,并可明显降低角叉菜胶所致小鼠足肿胀度。3.3镇痛作用银翘马勃散能显著减少醋酸致小鼠的扭体次数,并可显著减少甲醛致小鼠在第II时相的舔足时间。3.4解热作用与模型组相比,银翘马勃散组大鼠造模后体温升高幅度明显下降。实验结论1.银翘马勃散质量控制方法的研究所测药材均符合《药典》的规定;建立了 HPLC法同时测定银翘马勃散水提物中5种有效成分含量的方法,且该方法简单、准确、稳定。2.银翘马勃散在体外能有效抑制3种病毒在宿主细胞的生物合成,对HAdV3吸附A549细胞有抑制作用,且对HAdV3和HiN1有预防作用;其对H1N1感染小鼠有死亡保护作用,并对其肺部损伤有改善作用。3.银翘马勃散利咽、抗炎、镇痛、解热作用的研究实验证明银翘马勃散具有良好的利咽、抗炎、镇痛、解热作用。