转BrERFn基因烟草植物的抗虫耐旱耐除草剂性能的研究

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作物受到的生物胁迫和非生物胁迫是影响作物生产高产优质高效安全的重要因素。抗性基因特别是植物源抗性基因是作物应对生物胁迫和非生物胁迫的有效手段,是重要的抗性资源。BrERFn基因是一个功能不明确的ERF转录因子,本文开展转BrERFn基因烟草对烟草抗虫性、耐旱性、耐除草剂性能的影响研究,对于BrERFn基因的利用,对于丰富基因资源、抗性育种,减少作物虫害、旱害及除草剂药害,具有重要的学术价值和应用潜力。本研究摘要如下:  1.采用抗生素筛选和RT-PCR检测相结合的方法筛选转BrERFn基因本氏烟植物纯合子。通过转BrERFn基因的本氏烟F0代植株苗,取叶片进行RT-PCR;F0代植株种子再利用Kana霉素培养基筛选,植株苗RT-PCR检测;F1代植株种子再利用 Kana霉素培养基筛选,结果成功获得转 BrERFn基因的本氏烟株系TNb12-3为纯合子株系。  2.采用八叶苗后不浇水的自然干旱法研究转BrERFn基因本氏烟植物对干旱的耐性,结果表明,转BrERFn基因本氏烟植物对干旱的耐性明显强于非转基因本氏烟,转BrERFn基因本氏烟植物萎蔫和死亡明显延迟。采用八叶苗后喷施40%草丁膦300倍水液,研究转BrERFn基因本氏烟植物对除草剂草丁膦的耐性,结果表明,转BrERFn基因本氏烟植物对除草剂草丁膦的耐性明显强于非转基因本氏烟,转BrERFn基因本氏烟植物萎蔫和死亡明显延迟。  3.转BrERFn基因的K326烟草植物抗虫性研究。采用抗生素筛选和RT-PCR检测相结合的方法检测鉴定试验植株为转BrERFn基因的K326烟草植株。采用培养皿内饲叶法,以斜纹夜蛾幼虫为试虫,设转BrERFn基因的K326烟草植物叶饲喂处理和非转基因的K326植物叶饲喂处理,斜纹夜蛾实验结果表明,幼虫存活率有极显著差异,转BrERFn基因的K326烟草植物处理的斜纹夜蛾幼虫死亡率达到75%,校正死亡率达到71.4%。采用培养皿内饲叶法,以无翅桃蚜1龄若虫为试虫,设转BrERFn基因的K326烟草植物叶饲喂处理和非转基因的K326植物叶饲喂处理,桃蚜实验结果表明,桃蚜存活率有极显著差异,转BrERFn基因的K326烟草植物处理的死亡率达到65%,校正死亡率达到52.5%;桃蚜繁殖率有极显著差异,转BrERFn基因的K326烟草植物处理的桃蚜繁殖率是对照处理的37%。  综合表明,转BrERFn基因烟草植物的抗虫性、耐旱性、耐除草剂草丁膦性能都高于相应品种对照植株,BrERFn基因具有抗斜纹夜蛾和桃蚜功能,耐旱性、耐除草剂草丁膦的功能。
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