PuraMatrix水凝胶三维培养对人脐带MSCs向胰岛样细胞团分化的影响

被引量 : 0次 | 上传用户:wangpengdz
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:在二维培养条件下用单纯生物学制剂诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)向胰岛样细胞团(ILCs)分化,筛选出能表达激素原转换酶PC1和PC2的最佳诱导方案;在PuraMatrix (PM)水凝胶中对hUC-MSCs进行三维培养,找到最佳浓度和最佳作用时间点后,用上述筛选出的最佳方案进行诱导,探讨PM三维培养对hUC-MSCs向ILCs分化的影响。方法:从人的完整脐带中分离和纯化hUC-MSCs,流式细胞仪、RT-PCR和免疫细胞荧光染色技术检测其干细胞标志进行鉴定。在二维培养条件下选用A、B、C三种方案诱导hUC-MSCs向ILCs分化,在诱导前后采用qPCR和Western blot检测PC1和PC2的表达情况以确定最佳诱导方案。将hUC-MSCs接种于经过一定预处理的不同浓度的PM中进行三维培养,通过观察细胞形态、检测细胞活性和干细胞标志基因的表达情况来确定最佳浓度和最佳作用时间点,再用上述筛选出的最佳方案诱导在PM中生长的hUC-MSCs向ILCs分化,检测pc1、pc2和insulin等基因的表达情况。结果: hUC-MSCs普遍表达Nestin,轻微表达isl1。A、B、C三种方案诱导的ILCs有逐渐成熟的趋势;qPCR及Western blot检测表明PC1仅在方案C中有表达,而PC2在方案B和方案C中均有表达,但后者显著高于前者(P<0.01)。cck8结果显示hUC-MSCs在低浓度(0.125%和0.25%)PM中的生长速率比在高浓度(0.5%和0.75%)PM高,但hUC-MSCs在高浓度PM中呈团状生长,且表达一定水平的nestin及少量pc1,pc2和insulin;经方案C诱导后,0.5%PM中的hUC-MSCs的pc1,pc2和insulin表达量均高于二维培养环境下诱导的表达量(P <0.01)。结论:hUC-MSCs在一定条件下可诱导分化为ILCs,方案C为本实验筛选出中的最佳方案。hUC-MSCs在0.5%PM中可聚集成团,表达少量胰岛发育相关基因;用上述方案C诱导后形成ILCs,胰岛相关基因表达增多,表明0.5%PM三维培养可促进hUC-MSCs向ILCs分化。
其他文献
郭玉斌这本《萧红评传》出版于2009年6月,是一本新萧红评传.距美国学者葛浩文1979年出版的那本《萧红评传》已有130年之久,距骆宾基1947年出版的那本《萧红小传》已逾60年之久。
一、建立财政资金绩效考评体系的必要性(一)理论分析。财政支出绩效考评是指财政部门根据设定的目标,运用科学、规范的绩效评价方法和统一的评价标准,按照
目的分析Von Hippel-Lindau(VHL)综合征相关腹部脏器病变的影像特点,以提高对该病的全面诊断。方法回顾性分析27例VHL综合征患者的腹部影像特征。17例行腹部CT平扫加增强检查
本实验研究了市售8中国内外知名品牌木聚糖酶产品的耐热性、耐胃蛋白酶性以及胰蛋白酶性。研究结果表明:液体发酵所得木聚糖酶产品比固体发酵所得木聚糖酶产品耐热性强;胰蛋白
直流换流阀阻尼系统由饱和电抗器铁心电阻和晶闸管级阻尼电阻2部分组成。该文提出了饱和电抗器动态电感和铁心电阻分析计算方法,建立了铁心电阻与磁通密度的函数关系及饱和电
科学课是带领学生探索科学、探索自然,了解现实社会、了解天文地理的重要学科。在科学课中纳入深度学习理念,让学生从理性层面感受科学知识,有助于学生核心素养的提升。长此
<正>当前,构建科学的财政资金监督评价体系、并以此促进财政改革的深化和财政管理水平的提高,已成为摆在各级财政监督机构和全体监督干部面前亟待解决的重要课题。本文采用理
目的:建立、优化并对比呋喃它酮代谢物5-甲基吗啉–3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidinone, AMOZ)的胶体金与荧光猝灭免疫试层析检测方法。方法:将实验
《习近平谈治国理政》被誉为是“国际社会了解当代中国的重要窗口、寻找中国问题答案的一把钥匙”。自出版以来,该书备受国内外读者和研究人员关注。目前针对该书的研究视角主要有政治学习、思想文化、语言翻译、话语风格等,但对书中习近平的语言风格及其英译研究不多。本文拟从翻译风格论角度探讨《习近平谈治国理政》中习近平的语言风格及其英译,主要根据刘宓庆翻译风格论中的风格标记以及风格翻译手段两个方面,从音系层面、语
红色资源是中国共产党在革命战争年代和社会主义现代化建设时期所形成的具有资政育人意义的历史遗存,包含物质形态、精神形态、制度形态以及信息形态四种形态。红色资源作为思