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目的:在二维培养条件下用单纯生物学制剂诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)向胰岛样细胞团(ILCs)分化,筛选出能表达激素原转换酶PC1和PC2的最佳诱导方案;在PuraMatrix (PM)水凝胶中对hUC-MSCs进行三维培养,找到最佳浓度和最佳作用时间点后,用上述筛选出的最佳方案进行诱导,探讨PM三维培养对hUC-MSCs向ILCs分化的影响。方法:从人的完整脐带中分离和纯化hUC-MSCs,流式细胞仪、RT-PCR和免疫细胞荧光染色技术检测其干细胞标志进行鉴定。在二维培养条件下选用A、B、C三种方案诱导hUC-MSCs向ILCs分化,在诱导前后采用qPCR和Western blot检测PC1和PC2的表达情况以确定最佳诱导方案。将hUC-MSCs接种于经过一定预处理的不同浓度的PM中进行三维培养,通过观察细胞形态、检测细胞活性和干细胞标志基因的表达情况来确定最佳浓度和最佳作用时间点,再用上述筛选出的最佳方案诱导在PM中生长的hUC-MSCs向ILCs分化,检测pc1、pc2和insulin等基因的表达情况。结果: hUC-MSCs普遍表达Nestin,轻微表达isl1。A、B、C三种方案诱导的ILCs有逐渐成熟的趋势;qPCR及Western blot检测表明PC1仅在方案C中有表达,而PC2在方案B和方案C中均有表达,但后者显著高于前者(P<0.01)。cck8结果显示hUC-MSCs在低浓度(0.125%和0.25%)PM中的生长速率比在高浓度(0.5%和0.75%)PM高,但hUC-MSCs在高浓度PM中呈团状生长,且表达一定水平的nestin及少量pc1,pc2和insulin;经方案C诱导后,0.5%PM中的hUC-MSCs的pc1,pc2和insulin表达量均高于二维培养环境下诱导的表达量(P <0.01)。结论:hUC-MSCs在一定条件下可诱导分化为ILCs,方案C为本实验筛选出中的最佳方案。hUC-MSCs在0.5%PM中可聚集成团,表达少量胰岛发育相关基因;用上述方案C诱导后形成ILCs,胰岛相关基因表达增多,表明0.5%PM三维培养可促进hUC-MSCs向ILCs分化。