细菌感染对家蚕DNA甲基化与组蛋白乙酰化相关基因表达的影响

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家蚕是一种重要的经济昆虫,在饲养过程中很容易感染细菌、病毒等发生蚕病,影响蚕丝产量,对蚕农造成巨大的经济损失,因而需要对家蚕抵御病原物的免疫机制进行深入研究,从而为防治蚕病提供理论依据。为探讨表观遗传修饰中的DNA甲基化和组蛋白乙酰化对家蚕免疫反应的相关性,我们进行了一系列的试验,结果如下:1、根据已知的人类DNMT、HDAC、HAT基因序列,在家蚕数据库中筛选出了家蚕的两个DNA甲基转移酶基因,BmDNMT1和BmDNMT2;两个组蛋白去乙酰化酶基因,BmHDACI-1和BmHDACI-2;一个组蛋白乙酰转移酶基因BmHAT1。2、根据家蚕的DNA甲基转移酶BmDNMT1、组蛋白去乙酰化酶BmHDACs和组蛋白乙酰转移酶BmHAT的氨基酸序列,在NCBI中搜索得到其他物种相似的蛋白序列,进行系统进化分析。分析结果显示,BmDNMT1和其他昆虫DNMT1的氨基酸序列相差很大,进化上呈现特殊性。BmHDACs和BmHAT和其他昆虫的HDACs和HAT在进化上相对保守。3、利用定量PCR技术检测发现,家蚕感染病原菌绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus后,BmDNMT1、BmHDACI-1、BmHDACI-2和BmHAT1在家蚕脂肪体中的表达水平均有不同程度的上调。然而用DNMT、HDAC和HAT三种抑制剂处理家蚕时,未观察到DNMT抑制剂、HDAC抑制剂或HAT抑制剂对家蚕感染细菌后的存活率有显著的影响。综合以上试验结果,我们推测DNA甲基化和组蛋白乙酰化/去乙酰化可能参与家蚕免疫防御反应的调控。
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