本论文针对二维液相色谱发展中所面临的问题,从复杂样品分析的需求出发,展开了二维液相色谱体系的理论研究和实际应用。结合本课题组开发的新型分离材料,建立了基于联萘柱与C18柱的二维反相／反相液相色谱系统,以中心切割方式在第一维选择性富集大黄中的蒽醌,在第二维以液质联用方法对大黄中的蒽醌进行分离和鉴别。建立了基于环糊精柱和C18柱的二维亲水／反相液相色谱系统,以蛹虫草为研究对象,优化了第一维的亲水色谱条件,对第二维反相色谱分离中pH值对分离选择性进行考察,最终确定了pH 2.8为优化条件。采用离线二维的方式,在第一维将蛹虫草组分划分为12个组分,第二维对组分的分离可以将第一维中共流出的组分进行了有效的分离。亲水-反相二维系统具有较好的正交性,利用该方法可以发现复杂体系中更多的化学物质基础,特别是微量组分。捕获柱是重要的二维接口。通过定量地比较第一维色谱柱接捕获柱和不接捕获柱的保留时间,峰面积和峰展宽差异,建立了捕获柱的评价体系,考察了影响捕获柱捕获能力的主要因素。通过该方法可以对捕获柱进行筛选,考察样品含量及性质对捕获能力的影响,直观比较和优化对复杂样品的捕获能力。