血脂异常ApoE基因缺失小鼠RPE-Bruch膜-脉络膜毛细血管复合体的实验研究

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目的:观察血脂异常ApoE基因缺失小鼠(ApoE-/-)视网膜色素上皮-玻璃膜-脉络膜毛细血管复合体(RBCC)改变,以选择年龄相关性黄斑变性(AMD)的实验动物。方法:随机将24只2月龄ApoE-/-小鼠和24只2月龄C57BL/6J小鼠分别分为高脂组和普食组,每组动物12只,4月后将以上动物处死,采血检测各组血脂及血液流变学指标,各组RBCC行光镜和电镜观察及免疫组化检测,视网膜行Western blot检测。用SPSS17.0统计软件包,对实验数据结果进行统计学处理。结果:(1)6月龄ApoE-/-高脂组体重、血脂及血液流变学指标均高于6月龄ApoE-/-普食组及6月龄C57BL高脂组;6月龄C57BL高脂组与普食组间差异有统计学意义。(2)6月龄ApoE-/-高脂组与6月龄ApoE-/-普食组、6月龄C57BL高脂组比较,视网膜色素上皮(RPE)厚度明显变薄;6月龄C57BL高脂组与普食组间差异无统计学意义。(3)6月龄ApoE-/-高脂组Bruch膜厚度明显增厚,与6月龄ApoE-/-普食组及6月龄C57BL高脂组间差异有统计学意义;6月龄C57BL高脂组与普食组间差异有统计学意义。(4)6月龄ApoE-/-高脂组RBCC中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的染色面积总和及积分光密度总和与6月龄ApoE-/-普食组和6月龄C57BL高脂组间差异有统计学意义;6月龄C57BL高脂组与普食组间差异有统计学意义。(5)6月龄ApoE-/高脂组RBCC中血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)蛋白的染色面积总和及积分光密度总和与6月龄ApoE-/-普食组和6月龄C57BL高脂组间差异有统计学意义;6月龄C57BL高脂组与普食组间差异无统计学意义。(6)6月龄ApoE-/-高脂组与6月龄ApoE-/-普食组、6月龄C57BL高脂组比较,Western blot检测视网膜中VEGF蛋白水平显著提高;6月龄C57BL高脂组与普食组间差异无统计学意义。结论:(1)高脂ApoE-/-小鼠与高脂C57BL小鼠RBCC组织发生病理改变,其改变与AMD的改变相似;(2)高脂ApoE-/-小鼠通过免疫组化检测RBCC组织VEGF、 VEGFR2表达及Western blot检测视网膜VEGF表达符合AMD的改变;(3)高脂ApoE-/小鼠与高脂C57BL小鼠的改变相比较,前者与AMD的改变更为相似,故选择ApoE-/-小鼠作为本课题研究的实验动物。
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