离体器官的再生受到多种内外因素的影响,但是目前还没有工作对这些因素进行系统的研究。本文首先以拟南芥的根为外植体,建立了一步法拟南芥苗离体再生体系。该体系简单易操作,实验周期短,离体苗再生频率高、同步性好,为进一步的研究提供了良好平台。在此基础上,我们从外植体遗传背景、组织来源、激素种类、浓度等方面系统地分析了影响拟南芥苗再生的因素。结果如下:1.不同种类的生长素对于愈伤组织的形成影响较大。NAA与2,4-D比IAA更易诱导愈伤组织的形成。2.不同种类的激素在一定浓度范围内促进离体苗再生。细胞分裂素6-BA能够分化苗的上限浓度比ZT低,即细胞分裂素ZT在一定浓度范围内诱导苗再生;生长素IAA,NAA,2,4-D同样在一定浓度范围内诱导苗再生,浓度范围分别在10.0-20.0μM,1.0-10.0μM,0.1μM左右。因此激素的种类其浓度范围对分化苗起重要作用。3.不同生态型之间离体苗的再生频率变化较大。Ws生态型比Col生态型分化频率高,分化时间短,且再生苗发育正常。4.根的不同组织来源(分生区和伸长区、根毛区)对于拟南芥离体苗的再生影响较小,平均每块愈伤组织分化苗的数目随着细胞分裂素的升高略有降低。5.离体苗的再生需要特定的基本培养基。在同样激素条件下,MS培养基不能诱导正常的愈伤组织以及苗的再生,而B5培养基则能够高效诱导苗的再生。