藤黄酸诱导人结直肠癌细胞凋亡及其对Bax、Bcl-2和Caspase-3表达影响的研究

来源 :广州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuji19840718
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目的:  探讨藤黄酸诱导人结直肠癌细胞凋亡及其对Bax、Bcl-2和Caspase-3表达影响的研究。  方法:  体外培养结肠癌细胞株(SW480、LOVO),采用不同浓度、不同作用时间的藤黄酸(0、0.25、0.5、1、2、4、8μmol/L)对其进行干预,CCK-8法检测藤黄酸对结肠癌细胞株的增殖抑制作用;细胞划痕实验检测藤黄酸对结肠癌细胞迁移能力的影响;免疫荧光染色技术检测结肠癌细胞株凋亡情况;Western Blot技术检测bax、bcl-2、cleaved caspase-3蛋白表达水平。  结果:  1、藤黄酸体外对结肠癌SW480、LOVO细胞株均有显著的增殖抑制作用,抑制率与药物浓度和作用时间成正相关,当藤黄酸浓度达到8μmol/L时,24h对SW480、LOVO的抑制率分别为:(81.36±0.02)%、(79.31±0.02)%;随着作用时间的延长,藤黄酸作用72h时,对两株结肠癌细胞的抑制率均达到90%以上。  2、细胞划痕实验证实,藤黄酸(2μmol/L)作用组结肠癌 SW480、LOVO细胞株迁移能力均明显低于对照组(0μmol/L),藤黄酸作用组结肠癌细胞株迁移距离差异均无统计学意义(P>0.05)。  3、藤黄酸(2μmol/L)作用结肠癌SW480、LOVO细胞株12h后,开始出现活化型(cleaved) caspase-3的表达,提示细胞开始出现凋亡;在cleaved caspase-3荧光着色区域可见到细胞核固缩、碎裂等典型的凋亡核形态。  4、不同浓度GA(0、1、2、4μmol/L)作用结肠癌SW480细胞株后,caspase-3蛋白表达水平呈浓度依赖性升高,差异有统计学意义(P<0.05), bax蛋白表达水平在4μmol/LGA作用组较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05), bcl-2蛋白表达水平在2、4μmol/LGA作用组较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度GA(0、1、2、4μmol/L)作用结肠癌 LOVO细胞株后, bax、caspase-3蛋白表达水平呈浓度依赖性升高,差异有统计学意义(P<0.05), bcl-2蛋白表达水平均呈浓度依赖性下降,差异有统计学意义(P<0.05)。  结论:  藤黄酸能明显抑制结肠癌细胞株 SW480、LOVO的增殖并诱导其凋亡,其机制可能是通过激活caspase-3、提高bax/bcl-2的比例实现的。
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