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目的：Toll样受体(TLRs)及其信号是机体对抗病原微生物的重要机制,是联系先天免疫和后天免疫的重要桥梁。相关研究表明,TLR4在足细胞中表达,并且能够被激活从而介导足细胞损伤：此外,已有研究发现,TLR9在某些肾小球疾病的足细胞中表达,但它在足细胞损伤中的作用尚不清楚。本研究利用足细胞嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside, PAN)损伤模型,试图确定TLR9是否参与足细胞的损伤过程。方法：1.用PAN诱导体外培养的足细胞损伤,以定量逆转录PCR (qRT-PCR)和免疫印迹(Western Blotting, WB)检测足细胞TLR9以及该通路其它组分的变化,包括IRAKI, TRAF6, NF-κ Bp65, p38MAPK和IL12,用免疫荧光染色检测NF-K B p65核转移,以及用流式细胞术检查足细胞凋亡；此外,用PAN诱导大鼠足细胞损伤,以qRT-PCR和免疫组化法检测大鼠肾小球中TLR9表达变化。2.将TLR9干扰RNA (siRNA)表达质粒和对照质粒分别转染足细胞,用WB比较:NF-κ Bp65和p38 MAPK磷酸化、qRT-PCR比较IL12的mRNA变化,以及流式细胞仪比较足细胞凋亡情况,从而确定TLR9信号通路是否参与PAN诱导的足细胞损伤。结果：1.与对照相比,经PAN刺激的足细胞,其TLR9、IRAK1、TRAF6、IL12的mRNA水平明显上调,磷酸化p65和磷酸化p38显著增加,细胞凋亡增加,NF-κ Bp65发生核转移。PAN大鼠模型的肾小球中TLR9 mRNA表达上调,免疫组化显示出TLR9蛋白在足细胞中显著增加。2.足细胞转染TLR9干扰质粒后,TLR9的mRNA和蛋白表达水平降低；经PAN处理后,该细胞与转染对照siRNA的细胞相比,其磷酸化p65和磷酸化p38的水平降低,IL12的mRNA表达降低,以及足细胞凋亡减少。结论：TLR9信号通路参与了嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞损伤过程,其机制可能是促进炎症因子产生以及p38MAPK依赖的细胞凋亡。本研究提示TLR9信号通路在某些肾小球疾病中的作用。