转染miR-145的滑膜间充质干细胞外泌体治疗骨关节炎的实验研究

来源 :济宁医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maomao0464
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目的:研究转染mi R-145的滑膜间充质干细胞来源外泌体对骨关节炎的治疗作用。方法:选取2021年04月~06月于济宁医学院附属医院骨关节科住院行膝关节镜手术的患者,从患者滑膜标本中分离和培养滑膜间充质干细胞,用慢病毒作为载体将mi R-145转染至滑膜间充质干细胞,空病毒作为对照,提取外泌体。分为空病毒组(SMSC-Exos组),感染组(SMSC-145-Exos组)。通过q PCR检测mi R-145的表达。SD雄性大鼠20只,随机分成4个小组,每个小组5只大鼠双侧膝关节,正常组(n=10)、OA组(n=10)、OA+SMSC-Exos组(n=10)和OA+SMSC-145-Exos组(n=10)。采用切断大鼠双膝关节的内侧副韧带、前后交叉韧带以及内侧半月板的方法制作OA模型。向OA+SMSC-Exos组大鼠双膝关节腔内注射50μl(约1011颗粒/ml)空病毒外泌体,OA+SMSC-145-Exos组注射同等剂量经慢病毒感染的滑膜间充质干细胞mi R-145外泌体,每3天注射一次,共给药30天,正常组和OA组大鼠每次注射等量生理盐水。通过HE染色,使用Mankin评分对软骨损伤进行评估,Western blot测定collagenⅡ、Aggrecan、SOX9在大鼠软骨组织中的表达。结果:根据荧光定量实验结果可以得出,相比于对照组,SMSC-145-Exos组的mi R-145的m RNA的表达显著增加(P<0.05)。OA组Mankin评分高于正常组(P<0.05)。与OA组相比,OA+SMSC-Exos组和OA+SMSC-145-Exos组Mankin评分均较低(P<0.05)。与OA+SMSC-Exos组相比,OA+SMSC-145-Exos组Mankin评分较低(P<0.05)。与正常组相比,OA组的软骨分化标志基因collagenⅡ、Aggrecan和SOX9的表达水平均显著降低(P<0.05),SMSC-Exos组和SMSC-145-Exos组的collagenⅡ、Aggrecan和SOX9的表达水平均显著高于OA组(P<0.05)。结论:通过关节腔内注射SMSC-145-Exos对骨关节炎大鼠的软骨退变有着明显的抑制作用,并增强软骨的修复功能。SMSC-145-Exos可通过上调OA大鼠软骨组织中collagenⅡ、Aggrecan和SOX9的表达来发挥治疗OA的作用。
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