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第一部分 氧化应激对精子运动能力、膜功能及精子线粒体膜电位等的影响 目的:观察氧化应激对正常精子的运动能力、存活率、膜完整性以及膜脂类过氧化反应等因素的影响,以及氧化应激对精子线粒体膜电位的变化。 方法:采用简易上游法选择具有正常生理功能的人精子作为正常精子模型,应用FeSO4/H2O2体系产生活性氧(ROS),与精子模型孵育后,运用计算机辅助精液分析(CASA)系统,分别观察30min、60min精子运动方式参数的变化。应用伊红-Y染色法观察ROS对精子存活率的影响,低渗膨胀法检测精子膜完整性,巴氏染色法检测精子顶体完整率。应用硫巴比妥酸法(TBA)测定精子悬液中膜脂类过氧化反应产物丙二醛(MDA)含量。利用新型荧光探针JC-1标记精子线粒体,在流式细胞仪上检测JC-1荧光强度的变化。 结果: 1.与对照组相比,正常精子模型与ROS孵育30min后,除H2O20.05mmol/L浓度组之外,各组VCL、VSL、VAP均明显下降,BCF、MAD、STR等无明显改变。高浓度组ALH、LIN与对照组比较明显下降。 2.随着氧化剂浓度的增高(H2O20.5-5mmol/L),存活率、低渗膨胀率明显下降,与对照组比较有显著性差异,并且具有剂量依赖性。孵育60min后,各上述指标较30min值下降,但二者无显著性差异。 3.除H2O20.05mmol/L组外,各组MDA含量与对照组比较有显著性差异。