腹膜间皮细胞间质化在胃癌腹膜转移中的研究

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目的:研究腹膜间皮细胞在抵御胃癌细胞腹膜种植转移的作用,分析腹膜间皮细胞发生间质化改变(EMT,epithelial-to-mesenchymal transition)与胃癌腹膜转移的关系,从而推论腹膜间皮细胞在胃癌腹膜转移中可能扮演的角色。方法:本研究通过三组实验,观察胃癌细胞上清液对腹膜间皮细胞的损害,A组:空白对照组,不做任何处理;B组:实验对照组,予以无血清培养基处理;C组:实验组,予以胃癌细胞上清液处理。1.本研究采用细胞培养和建立动物模型,利用HE染色观察细胞形态改变,免疫组化及western分子生物学技术检测腹膜间皮细胞上皮细胞标志蛋白E-cadherin、Cytokeratin及间质化标志蛋白N-cadherin、Fibronectin的表达变化;2.利用胃癌细胞与间皮细胞共培养和建立胃癌腹膜转移模型,进行体内、体外观察腹膜间皮细胞对胃癌细胞侵袭的抵御作用。结果:1.腹膜间皮细胞经胃癌上清液处理后细胞形态由原来的卵圆形变为梭形细胞,细胞脱落,细胞间的紧密连接减少,细胞间纤维增多,而实验对照组及空白对照组腹膜间皮细胞均未见明显改变。2.对细胞及裸鼠模型组织进行免疫组化及western实验检测上皮细胞标志蛋白及间质化标志蛋白结果均显示,空白实验组及实验对照组两者的蛋白表达无明显差异,p>0.05差异无统计学意义。而空白实验组及实验对照组两者的上皮细胞标记蛋白E-cadherin、Cytokeratin的表达明显高于实验组,p<0.05差异有统计学意义,实验组的间质化标志蛋白N-cadherin、Fibronectin表达明显高于空白实验组和实验对照组p<0.05差异有统计学意义。3.培养瓶内的腹膜间皮细胞经胃癌上清液处理后,与其共培养的胃癌细胞贴壁数量明显增多。。同样动物实验中,经胃癌上清液处理后的裸鼠腹膜腔内胃癌结节数量更多,最大直径更大,p值均<0.05差异有统计学意义。结论:胃癌细胞可通过其分泌的上清液而诱导腹膜间皮细胞的形态学及分子生物学发生改变使腹膜间皮细胞受损,失去完整的腹膜间皮细胞层,进而暴露了大面积的腹膜基底层,从而利于胃癌细胞的定植生长。
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