原发性肝癌简称肝癌，是消化系统常见恶性肿瘤之一，一般好发于肝炎流行国家。在亚洲，中国和日本是肝癌的高发国家。中国肝癌的发病率较高，死亡人数每年达23万人之多，每年新患病人数占世界肝癌新患病人数55%，已成为我国高发病率、高死亡率的恶性肿瘤。在原发性肝癌临床确诊患者中，有80%已是晚期患者，大部分患者已不适合采用手术方法切除肿物。能够手术治疗的患者,大都是采用经皮肝动脉化疗栓塞术（Transcatheter Arterial Chemoembolization, TACE）进行外科治疗。虽然外科手术治疗具有一定的效果，但仍有部分患者会发生肝癌复发、肝内或肝外肿瘤科扩散转移等情况。因此，寻求综合、有效的治疗方法已经成为原发性肝癌治疗和研究急需解决的问题。查尔酮类化合物以1,3-二苯基丙烯酮为基本骨架结构，是植物体内合成黄酮的前体。由于查尔酮累化合物分子具有较大柔性，能与不同的生物受体结合，而表现出抗炎、抗病毒、抗氧化、镇痛、抗艾滋病、抗抑郁、抗真菌、免疫抑制等多种药理活性。有大量研究表明，查尔酮及其衍生物具有良好的抗肿瘤作用，能够从多靶点、多途径抑制多种肿瘤细胞的生物学活性。4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮是一种新合成的查尔酮衍生物，前期实验结果显示其对多种肿瘤细胞有较好的增殖抑制作用。本课题将4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮的研究开发和肝癌的生物学特性研究结合在一起，研究4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对肝癌细胞增殖、诱发凋亡、侵袭与转移等生物学行为的影响，并探讨4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮治疗肝癌的相关机制，本研究将对开发新的抗肝癌药物具有重要现实意义和应用价值。本研究在筛选4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对多种肝癌细胞抑制作用基础上，又进行了对4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮较为敏感的人肝癌HCCLM3细胞系生物学行为干预作用的研究，并对4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮抗肝癌HCCLM3细胞的作用机制进行了初步探讨，为4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对肝癌HCCLM3细胞的生物学功能的影响和作用，提供实验基础和理论依据。1.4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对四种肝癌细胞的抑制作用方法：利用MTT法测定4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对HepG2、Bel7402、SMMC7721和HCCLM3四种肝癌细胞株的生长抑制情况，并测定IC，50。结果：4-甲基-2,4-二羟基查尔酮对肝癌HepG2、Bel7402、SMMC7721和HCCLM3四种细胞均有增殖抑制作用，IC50分别为0.57、0.84、1.24、0.486μmol/L，其中对HCCLM3的抑制效果最为明显,与阳性药物As2O3相近。结论：4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对HepG2、Bel7402、SMMC7721和HCCLM3四种肝癌细胞均有增殖抑制作用，其中对肝癌HCCLM3细胞作用效果最好。2.4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对HCCLM3细胞凋亡的影响方法：Hochest染色和流式细胞术检测4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对HCCLM3细胞的凋亡作用。Westernblot检测了4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对对凋亡通路中信号物质pro-Caspase-9、Bcl-2，Bαx和Caspase-3的表达的干预作用。结果：4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮可以HCCLM3细胞发生凋亡。4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮可上调pro-Caspase-9表达量，可以使bαx基因的表达上调，bcl-2表达下调，上调Caspase-3的表达，激活凋亡信号通路。结论：4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮可以在体外抑制HCCLM3细胞的增殖，并诱导其凋亡。可以作用于pro-Caspase-9、bcl-2/bαx家族，活化Caspase-3，诱导凋亡发生。3.4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对HCCLM3细胞侵袭和转移的影响方法：利用细胞划痕实验、Transwell侵袭小室模型，观察4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮对HCCLM3细胞侵袭能力的影响。结果：0.4μmol/L和0.8μmol/L4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮作用HCCLM3细胞12h后，能显著抑制细胞的侵袭能力（P＜0.01）。其中0.4μmol/L组的抑制率为40.05%，0.8μmol/L组的抑制率为53.72%。结论：4，-甲基-2,4-二羟基查尔酮能够在体外抑制HCCLM3细胞的侵袭和转移的能力。