本研究采用薄层色谱法，对冬凌草全草提取物中的冬凌草甲素、冬凌草乙素进行鉴别分析，结果斑点清晰、重现性好。采用高效液相色谱法对冬凌草甲素、冬凌草乙素进行了含量测定，线性范围分别为0.152～1.52μg·ml^-1，0.1～1.0μg·ml^-1；相关系数分别为0.9998和0.9992；回收率分别为97.2％和97.8％；RSD分别为0.6％和0.7％（n=6）。为冬凌草有效成分的分析提供了定性、定量的依据。 对超临界CO₂萃取、溶剂回流提取和冷浸提取所得浸膏做抗菌试验，结果表明，超临界CO₂萃取所得浸膏的抑菌、杀菌效果明显优于传统溶剂法。 通过对夹带剂种类、提取时间、二氧化碳流量、压力、温度、夹带剂量的单因素考察，绘制影响因素曲线；采用正交试验设计方法，以浸膏含量、冬凌草甲素含量、冬凌草乙素含量为指标，优化了冬凌草超临界CO₂萃取的工艺，优化工艺为温度50℃，压力30Mpa，夹带剂用量为1:1.5（w／v），CO₂流量为2.4L／h，提取时间为4h。与传统的溶剂提取工艺比较，超临界CO₂萃取法提取时间短，含量高，后处理简单。采用超临界二氧化碳萃取法萃取冬凌草全草工艺可行，具有应用价值。