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乙型肝炎病毒（HBV）感染在我国十分严重，有HBV感染史的人群高达50—70％，约10％的感染者发生各种临床类型的乙型肝炎。基中重型肝炎死亡率高，且目前尚无有效的治疗方法。近年来研究表明，HBV感染患者TNF水平明显增高，重型肝炎患者TNF水平增高最为显著，并认为高水平TNF是导致肝细胞损害或大面积肝细胞坏死的重要介质。因此进一步探讨TNF与HBV感染的关系，并寻找TNF抑制药用于治疗重型肝炎有重要意义。据此，我们进行了以下研究。 一、TNF细胞毒活性测定方法的比较 为了确定一种TNF细胞毒活性测定方法，我们以L929细胞作靶细胞，对常用的中性红测定法、结晶紫测定法、3HTdR释放法和MTT测定法在控制条件下进行比较，结果表明：前三种方法的敏感性相似，MTT测定法的敏感性低于其它三种方法。用3×104／孔L929靶细胞经ActD处理的结晶紫测定法具有简便快速、灵敏、稳定、不需要放射性同位素等特点。 二、TNF与HBV感染的关系 1、乙型肝炎患者血清TNF水平及其与IFN、IL—2和病毒复制的关系 通过同时测定HBV感染患者血清TNF、IFN、IL—2、ALT和HBeAg，结果显示：AH和CAH患者血清TNF水平分别为785.02±965.29pg／ml（n=39）1629.16±1183.50pg／ml（n=11），均显著高于正常人（165.53±98.53pg／ml，n=10），且CAH比AH患者TNF水平增高更显著。AH和CAH伴HBeAg阳性比阴性患者血清TNF水平增高更显著。在AH中，TNF水平显著增高者（＞800pg／ml）血清IFN和IL—2水平在正常范围内，而TNF水平极低者（＜20pg／ml）血清IFN和IL—2水平也很低。AH和CAH患者血清TNF与ALT水平无相关性。据此，我们认为：HBV复制是体内TNF增高的因素之一。在AH患者，血清TNF水平与IFN、IL—2水平有一定的正相关性。 2、TNF与DHBV感染的关系 由于病人感染HBV的时间不明，且难于动态观察感染后TNF水平的变化，因而我们把DHBV感染鸭模型用于实验。结果显示：DHBV感染的第1天，鸭血清TNF水平就明显升高，达51.46±19.57pg／ml（n=8），而同龄正常对照鸭血清不能测到TNF。感染后第7天，TNF水平显著升高，达86.81±9.91pg／ml（n=8），此时血清DHBV DNA水平也显著升高。感染后第28天DHBVDNA