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目的:肝移植是治疗终末期肝病的唯一有效手段。肝移植术后,尤其是因患乙型肝炎（Hepatitis B Virus,HBV）导致肝衰竭做肝移植手术的患者,术后面临的最大问题是HBV复发。肝移植术后注射乙肝疫苗是优秀的防治HBV复发的手段之一。肝移植受者术后接种乙型肝炎疫苗,可有一定比率的患者产生乙肝表面抗体,并使受者对HBV产生主动免疫。肝移植术后乙肝疫苗接种者在接受标准乙肝疫苗接种方案后缺乏或产生不充分的抗体反应的人数比例大约在60%-70%,远高于健康疫苗接种者的5%-10%,但其机制及原理仍不明。肝移植术后HBV复发的患者预后情况不佳,甚至会对患者生命造成威胁,探究肝移植术后HBV复发的机制,并进行免疫学防治,是当前临床亟待解决的问题。滤泡辅助性T细胞（Follicular helper T cell,Tfh）是近年来新发现的一种CD4+T细胞亚群,在免疫反应中起到辅助B细胞的作用。对抗体应答的过程至关重要,并与多种疾病的发生发展密切相关。基于此,通过对肝移植术后接种乙肝疫苗产生的免疫反应进行研究可以促进对这种不良反应的免疫事件的了解。拟检测肝移植术后患者乙肝疫苗注射后抗体的产生情况,并揭示其是否受Tfh细胞亚群的影响,明确Tfh细胞的各个亚群在相关免疫应答中的表达情况与外周血Tfh细胞的细胞因子对B细胞产生的影响,以期为肝移植术后远期生存率提供理论依据。方法:1、本研究对象选取了2016-2019年在青岛大学附属医院行肝移植手术的患者,所有纳入者均符合以下标准:（1）有肝移植术史。（2）移植术前都有乙型肝炎病史。（3）肝移植术后接种乙肝疫苗。（4）接种时间2-3年。通过问卷调查获得接种记录中的年龄、性别、乙肝疫苗接种史等基本信息。纳入者根据抗体滴度分为乙肝疫苗应答组（＞100 IU/L）与乙肝疫苗未应答组（＜10 IU/L）两组,平均年龄51岁（41-75岁）,性别7/2（男/女）。2、通过流式细胞术检测Tfh细胞亚群与B细胞的细胞频率,对Tfh细胞亚群进行分型,通过CD3、CD4、CXCR3、CXCR5和CCR6的表达情况鉴别出Tfh细胞亚群（CD3+CD4+CXCR5+）,其中Tfh1细胞（CD3+CD4+CXCR3+CXCR5+CCR6-）、Tfh2细胞（CD3+CD4+CXCR3-CXCR5+CCR6-）、Tfh17细胞（CD3+CD4+CXCR3-CXCR5+CCR6+）,通过CD19标记B细胞（CD19+）。3、酶联免疫吸附试验检测乙肝抗体及其相关免疫因子,使用人乙肝表面抗体、IL-21、IL-4的ELISA试剂盒对受试者外周血乙肝表面抗体、IL-21、IL-4进行定量检测。4、Tfh细胞亚群与乙肝表面抗体产生的相关性分析。将Tfh细胞亚群与受试者体内乙肝表面抗体滴度进行相关性分析。将外周血中Tfh细胞分泌的细胞因子IL-21、IL-4与B细胞的细胞频率进行相关性分析。结果:1、CD3+CD4+T细胞与乙肝疫苗应答具有相关性。肝移植术后乙肝疫苗应答者体内的CD3+CD4+T细胞的细胞频率显著高于未应答组（P＜0.05）。2、Tfh细胞与乙肝疫苗应答具有相关性。肝移植术后乙肝疫苗应答者组的Tfh细胞的细胞频率显著高于未应答者组,而且Tfh细胞在淋巴细胞中的细胞频率和CD4+T细胞中的细胞频率在两组间都存在显著差异（t=2.534,P＜0.05）。3、Tfh细胞的亚群在乙肝疫苗应答中的作用。肝移植术后乙肝疫苗接种者中,Tfh2细胞在Tfh细胞中的细胞频率在两组之间没有显著差异（t=0.853,P＞0.05）。Tfh1细胞在Tfh细胞中的细胞频率在两组之间存在差异,且肝移植术后乙肝疫苗应答者组中Tfh1细胞的频率显著高于未应答者组（t=3.038,P＜0.05）。Tfh17细胞在Tfh细胞中的细胞频率在两组之间存在差异,且肝移植术后乙肝疫苗应答者组的Tfh17细胞频率显著低于未应答者组（t=3.872,P＜0.05）。4、Tfh1/Tfh17与乙肝疫苗应答具有相关性。肝移植术后乙肝疫苗接种者中的应答组中,抗体滴度与Tfh1/Tfh17呈正相关,且随着Tfh1/Tfh17的增大而增大（r=0.9824,P＜0.05）,与Tfh2细胞频率无显著联系。5、IL-21、IL-4在乙肝疫苗应答中的作用研究。外周血中的IL-21的浓度在应答组与未应答组间存在差异,且应答组IL-21的浓度显著高于未应答组（P＜0.05）。同样外周血中的IL-4的浓度在应答组与未应答组间存在差异,应答组IL-4的浓度显著高于未应答组（P＜0.01）。6、B细胞与外周血Tfh细胞的细胞因子具有相关性。肝移植术后乙肝疫苗接种者中,外周血B细胞的细胞频率与外周血中Tfh细胞的细胞因子IL-21与IL-4的浓度呈正相关且随着两者的升高而升高。结论:1、肝移植术后乙肝疫苗接种者中的应答者组的Tfh细胞频率显著高于未应答者组,而且Tfh细胞在淋巴细胞中的细胞频率和CD4+T细胞中的细胞频率在两组间都存在显著差异,提示肝移植术后乙肝疫苗接种者体内乙肝表面抗体的产生可能依赖于Tfh细胞,为肝移植术后HBV复发的发病机制提供线索。2、在肝移植术后乙肝疫苗接种者中乙肝表面抗体的产生依赖于外周血Tfh1细胞频率,Tfh1细胞与Tfh17细胞比值的偏移同样可能影响乙肝表面抗体的产生,为深入揭示肝移植术后肝脏局部免疫微环境提供新的理论依据。3、外周血Tfh细胞分泌的细胞因子IL-21与IL-4与B细胞的增殖密切相关且促进B细胞的增殖,为临床治疗提供线索。