目的：慢性肾功能衰竭是一种严重危害人类身体健康的慢性进展性疾病，在该病的防治中，中医药有着独特的优势，早中期采用中医中药是目前公认的重要方法。导师丁跃玲教授通过对肾脏疾病理论的多年研究和临床实践，认为肾小管间质纤维化除属于祖国医学脾。肾阳虚、正虚络阻、毒损肾络的范畴外，少阳失和、三焦不利是本病早期的又一重要病理机制。以张仲景的小柴胡汤和五苓散组成柴苓汤，具有疏解少阳、利水渗湿的功能，临床表明疏利少阳之法是延缓慢性肾功能衰竭进程的重要方法之一。为进一步探讨柴苓汤延缓慢性肾功能衰竭的作用机制进行了实验研究，该实验采用结扎大鼠单侧输尿管的肾小管间质纤维化模型，通过生化、光镜、免疫组化的方法以及病理图像分析，观察了该方对24h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮等项肾功能指标及肾组织病理形态学改变、MCP-1和α-SMA表达的影响，为疏利少阳之法论治慢性肾衰的作用机制提供进一步的实验依据。 第一部分柴苓汤对梗阻性肾病大鼠肾功能及肾组织病理形态学的影响 方法：纯系健康SD雌性大鼠40只，随机分为假手术组(Sham group)、病理模型组(UUO group)、柴苓汤组(UUOCgroup)、缬沙坦组(UUOV group)。造模方法：采用结扎大鼠单侧输尿管(UUO)复制肾小管一间质损伤模型。病理模型组、柴苓汤组、缬沙坦组均结扎左侧输尿管。从造模前一天起开始预防性治疗，病理模型组和假手术组给予等量蒸馏水灌胃。实验周期共2周。实验结束后，取左、右肾称重，留取光镜标本。测定24h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮。肾组织光镜标本HE和Masson染色后，光镜下观察肾脏皮质区及皮髓交界区肾小管和间质的结构变化。 结果: 1.左肾重/右肾重、24h尿蛋白定量检测结果病理模型组大鼠体重增长缓慢，甚至下降，实验结束时，左侧肾脏体积增大。左肾重/右肾重：假手术组(1.00±0.04)，病理模型组(3.25±0.73)，柴苓汤组(2.16±0.31)，缬沙坦组(2.16±0.25)；病理模型组显著高于假手术组；柴苓汤组、缬沙坦组与病理模型组比较有所降低。24h尿蛋白各组比较无显著性差异。 2.血肌酐、尿素氮测定结果血肌酐实验各组与假手术组比较无明显差异。尿素氮：假手术组(3.30±0.38)，病理模型组(6.28±1.14)，柴苓汤组(4.26±0.52)，缬沙坦组(4.24±0.55)；病理模型组明显高于假手术组，柴苓汤组、缬沙坦组与病理模型组比较明显降低。 3.肾组织病理形态学观察光镜下假手术组肾小球和肾小管及间质结构正常；病理模型组HE染色可见肾皮质区及皮髓交界处肾小管上皮细胞坏死脱落，肾小管管腔扩张，部分肾小管呈灶状萎缩，间质增宽，间质内可见炎性细胞浸润；Masson染色可见增宽的间质区大量胶原纤维增生，间质纤维化呈灶状分布；柴苓汤组和缬沙坦组光镜下肾小管和肾间质病理改变较病理模型组明显改善，肾小管较少萎缩、管腔轻度扩张，上皮细胞坏死、脱落较少，肾间质增宽较轻、少量炎性细胞浸润，肾小管间质纤维化程度较轻。 第二部分柴苓汤对肾小管间质纤维化大鼠MCP-1、α-SMA表达的影响 方法：实验动物及分组、模型制作和给药方法同前。肾组织的α-SMA、MCP-1蛋白表达采用免疫组化PV-6001/PV-6002二步免疫组化检测法。镜下观察α-SMA、MCP-1免疫组化表达结果并进行病理图像半定量分析。 结果: 1.肾组织α-SMA的免疫组化检测结果光镜下观察：假手术组肾小上皮细胞无表达，仅血管平滑肌细胞有强阳性表达；模型组主要在皮质区及皮髓交界的肾小管及间质区细胞浆内，以部分肾小管上皮细胞及其周围间质区表达明显，且与局部间质增宽及肾小管病变程度一致；柴苓汤组、缬沙坦组较病理模型组明显减少。病理图象半定量分析平均积分光密度、面密度：假手术组(400.32±206.55；2.45±0.5)，病理模型组(10847.93±1446.45；66.88±20.67)，柴苓汤组(3770.16±471.70；25.45±6.36)，缬沙坦组(3386.80±300.31；23.27±6.02)；病理模型组明显高于假手术组；柴苓汤组和缬沙坦组较病理模型组两项指标明显减少；柴苓汤组与缬沙汤坦组比较无显著性差异。 2.肾组织MCP-1的免疫组化检测结果光镜下观察：假手术组肾小管.间质只有极少量MCP-1表达；模型组MCP-1表达主要位于肾小管上皮细胞，部分间质细胞也有表达，且与炎性细胞浸润程度一致，柴苓汤组和缬沙坦组较模型组明显减少。病理图象半定量分析平均积分光密度、面密度：假手术组(119.05±52.80；0.38±0.19)，病理模型组(3148.57±607.22；17.76±3.45)，柴苓汤组(998.33±276.78；5.63±1.75)，缬沙坦组(1332.52±232.68；6.28±1.43)；病理模型组明显高于假手术组；柴苓汤组较病理模型组两项指标明显减少；缬沙坦组。MCP-1也较病理模型组两项指标明显减少；柴苓汤组与缬沙坦组比较无显著差异。 结论: 1.柴苓汤可以改善UUO梗阻性肾病模型的左肾重/右肾重比值、尿素氮等项指标，提示柴苓汤有一定保护肾脏，改善肾功能的作用。 2.柴苓汤对肾小管上皮细胞有一定保护作用，并可能通过保护肾小管上皮细胞减轻肾间质纤维化。 3.柴苓汤能够抑制肾小管上皮细胞表型转化标志物的α-SMA.表达，减缓肾小管间质纤维化。 4.柴苓汤可能通过抑制MCP-1的生成，直接或间接限制炎症反应的放大过程，减少胶原纤维的合成和肾小管上皮细胞表型转化，从而减缓肾小管间质纤维化的进程。提示疏解少阳、利水渗湿的柴苓汤是防治和延缓慢性肾功能衰竭进展的有效方剂之一。