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肠道病毒71型(Enterovirus 71, EV71)属于小RNA病毒科肠道病毒属成员,是引起婴幼儿手足口病(Hand-foot-and-mouth disease, HFMD)的主要病原体之一,还常诱发无菌性脑膜炎和急性弛缓性麻痹等严重的神经系统疾病甚至死亡。同属肠道病毒的脊髓灰质炎病毒(Poliovirus, PV)在世界上大部分地区被疫苗有效根除以后,EV71因其能在大范围引起严重甚至致命性的传染病,被认为是目前最重要的嗜神经性病毒之一。目前,尚没有针对EV71的有效疫苗或者抗病毒疗法。尽管EV71如此重要,其非结构蛋白3AB在其复制过程所起到的作用却知之甚少。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,并利用麦芽糖融合蛋白亲和层析系统进行纯化,得到有活性有功能的重组3AB蛋白。研究发现,3AB蛋白具有解旋活性,能够解开两端单链突出的RNA-RNA双链,还能解旋两端单链突出的RNA-DNA双链和两端单链突出的DNA-DNA双链。并且3AB蛋白能够解旋3’端单链突出的RNA双链,还能解旋5’单链突出的RNA双链,但是不能解开平末端双链。这说明EV71的3AB蛋白的解旋活性不具有方向性或者极性。研究发现,3AB蛋白的解旋活性不需要镁离子。当镁离子浓度低于5 mM时,镁离子对EV71的3AB蛋白解旋活性的作用不敏感,然而当镁离子浓度在10 mM时,解旋活性受到中等程度的抑制作用。研究还发现,锌离子对3AB蛋白解旋活性的抑制作用十分灵敏,当锌离子在低浓度(≤0.5 mM)时,能够很大程度地抑制3AB蛋白的解旋活性。3AB蛋白的解旋反应不需要ATP的参与,并且该蛋白不具有ATP酶活性,说明3AB并不是解旋酶。3AB蛋白能够解开RNA链的结构,促进RNA链的退火反应,表明3AB蛋白具有RNA分子伴侣活性。对3AB蛋白的截短蛋白和突变体蛋白的解旋活性和退火活性研究发现,3A蛋白C端的7个氨基酸加上3B蛋白组成的3B+7蛋白也具有RNA分子伴侣活性,而Lys-8、 Phe-82、 Phe-85, Tyr-89和Arg-103五个氨基酸位点对3AB蛋白的RNA分子伴侣活性十分关键,有可能是其功能活性位点,有可能成为抗病毒治疗的理想靶点。综上所述,EV71的3AB蛋白具有RNA分子伴侣活性,是不断增加的由病毒编码的RNA分子伴侣的新成员。本研究工作填补了肠道病毒71型非结构蛋白3AB功能研究的空白,对EV71病毒生命周期中3AB的功能和作用有了更为深入了解,为今后针对EV71的抗病毒研究提供了理论基础。