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硒(Se)用于生物体内硒酶的合成,虫草菌可以促进机体内硒元素的有机转换,虫草菌添加硒使机体兼具食用菌和硒的双重活性。但是,目前国内外针对蛹虫草菌生长及代谢影响研究相对较少。本文主要针对硒对蛹虫草菌的生长代谢进行研究,以菌丝体生物量,有效成分,多糖含量,有机酸等为指标,研究硒对蛹虫草菌丝生长代谢影响;以目的基因表达量为依据,研究硒对蛹虫草菌抗氧化酶以及多糖合成代谢关键酶影响。通过液体发酵实验,确定最佳硒源为亚硒酸钠,亚硒酸钠浓度为7 μg/mL时,硒对蛹虫草菌生物量影响最大,加硒蛹虫草菌生物量可达13.190 g/L,与对照组相比(10.32 g/L),提高了 28.01%。通过固体平板培养实验观察基础组(空白组)和加硒组(7 μg/mL亚硒酸钠组)菌落特征,结果表明:加硒组菌落以接种点为核心向四周扩散更快,且加硒可以有效抑制蛹虫草菌老化。通过电镜扫描实验观察菌落微观特征,结果表明:加硒使菌体分生孢子数目多于基础组,且分布更集中。通过有效成分测定,确定加硒促进菌体代谢产物产量,总糖提高46.7%,虫草素提高46.7%,虫草酸提高23.4%,腺苷提高33.3%,有机酸、硫醇等代谢产物产量均显著提高。通过采用水提醇沉法分别从基础组和加硒组蛹虫草菌提取粗多糖,得率分别为1.16%和1.73%。采用Sephadex G-100柱层析法得到两种纯多糖分别命名为CMP-Ⅱ和SeCMP-Ⅱ,采用苯酚-硫酸法测得CMP-Ⅱ和Se CMP-Ⅱ总糖含量分别为86.65%和88.80%。采用高效液相色谱(HPLC)法检测CMP-Ⅱ和SeCMP-Ⅱ的重均分子量分别为1.936×103kDa和2.021×103kDa;采用红外光谱对结构进行表征,初步推断SeCMP-Ⅱ含有亚硒酸酯的特征吸收峰。使用旋光仪、核磁和电镜对CMP-和SeCMP-Ⅱ分析粗多糖结构,结果表明:加硒可以影响蛹虫草菌体内多糖结构。采用终止反应法测定基础组和加硒组菌丝体内过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)三种抗氧化酶以及磷酸葡萄糖变位酶(PGM)、UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)和磷酸葡萄糖异构酶(PGI)三种多糖合成代谢相关酶的活性,结果表明:加硒组抗氧化酶酶活性及生物量明显高于基础组;加硒组多糖合成代谢酶酶活性及多糖产量均显著增加。采用qRT-PCR技术进行检测编码 CAT、SOD、GSH-PX、PGM、UGP 和 PGI 的 cat、sod、shp-xg、pgm、pgi 和 ugp六种基因的表达水平,研究结果表明:加硒对三种关键抗氧化酶基因表达水平均产生影响,对sod的影响最大,表达量为对照组1.945倍,其中cat的表达量为对照组的0.758倍;加硒对三种多糖合成关键酶基因表达水平均产生影响,pgm的表达量最高,表达量为对照组1.940倍。