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研究背景：哮喘是由多种细胞参与的气道慢性炎症性疾病，并伴有可逆性气流阻塞、气道粘液高分泌及气道高反应性。其中嗜酸性粒细胞(Eos)在哮喘的发病中起了重要的作用，有学者甚至称哮喘气道慢性炎症为“气道Eos性炎症”。目前研究表明小鼠哮喘抗原激发后Eos发生有规律的自骨髓、经血液循环向气道迁移的反应，故又有“哮喘源自骨髓”一说。但对Eos上述迁移的机制尚不明了，普遍认为Eos自骨髓向肺组织的迁移受多种细胞因子与趋化因子共同调控。其中最受关注的是白介素-5(IL-5)与嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)。研究证明IL-5在从骨髓动员Eos及诱导Eos生长、分化、增殖、激活中具有重要作用，过量表达IL-5的哮喘模型转基因小鼠可引起血和肺组织Eos浸润及气道炎症。Eotaxin为Eos特异性趋化因子，对Eos具有高度选择性，可诱导Eos募集在组织中。对于两者的相互作用至今尚无定论。近年来哮喘的免疫治疗越来越受重视，其中通过阻断IL-5或Eotaxin而抑制嗜酸性粒细胞迁移已成为目前研究的热点。 研究假设：哮喘在抗原激发后Eos发生有规律的自骨髓、经血液循环到气道的迁移，骨髓Eos生成增加，而且这些变化与肺局部和／或循环中主要的Eos造血信号——IL-5和／或趋化信号——Eotaxin的作用密切相关。因此，通过应用抗IL-5单克隆抗体可抑制Eos从骨髓到气道的迁移。目前对Eotaxin促使Eos从血液中募集到肺组织内的作用已基本定论。然而，Eotaxin对Eos的募集作用是否必须依靠IL-5的存在尚有争论。本研究通过经鼻联合应用抗IL-5单克隆抗体和Eotaxin，观察在抗IL-5单克隆抗体阻断了IL-5的作用后，Eotaxin是否仍然能够发挥其对Eos的募集作用，肺组织内募集的Eos是否仍然增加。 本课题利用小鼠哮喘模型对上述假设进行了探讨。 研究方法：选择C57BL16小鼠，年龄6－吕周，体重18－22克，雄性。以卵 蛋白（OVA）作为抗原进行二次腹腔注射致敏和三次雾化吸入激发。同时设立 阴性对照组（即以生理盐水代替OVA作为抗原）。在最后一次抗原激发后48 ，J’时分别测定支气管肺泡灌洗液（BALF＼外周血＊B）和骨髓（BM）中炎 症细胞反应，以及肺组织内Eos的浸润。在此基础上，在每次OVA澈发前2 小时分别应用抗IL－5单克隆抗体、联合应用抗IL－5单克隆抗体（每次OVA激 6 发前二小时）和Eotaxin（最后一次OVA激发剐、时）鼻腔内滴注给药，以探 讨局部应用这些药物对哮喘小鼠E。s迁移的影响。 研究结果：OVA抗原激发后48’J’时小鼠的BALF、PB及BM中的E朋 分另为34．89土8．59X10‘／双肺（32．75士7．12o）、205．15士16．IX10’／ml（3．20土 0．63％）、1．25士0刀8X106／股骨（5．45上0．5％），细支气管和肺组织中有大量EoS 浸润，均较阴性对照组明显增加；在OVA激发前经鼻滴入抗IL．5单克隆抗体 则使OVA抗原激发后的BALF、PB及BM中的EoS数分别为0．74士0．35X旷／ 双肺（0．95士0．slo）、30．47士13．73X10’hal（．90士0．37％）、0．49土0．04X10‘／股骨 ＊．70土0．27％人 细支气管和肺组织内未见E加浸润，均较单纯OVA致敏激 发组明显减少：而在OVA激发前后经鼻联合滴入抗IL5单克隆抗体和＊OaX h 后，BALF、PB、BM中的EoS数分别为0．99士0．19X10‘／双肺门刀士0．18％）、 16．70士吕．14X10’／ml（0．50士0二二％）、0．32X106／股骨 豆．50士0．18％），细支气管和 肺组织中只有少许E。S散在，均较OVA激发者明显减少，而与应用抗IL－5单 克隆抗体组的BALF、PB、BM中的Eos数及细支气管、肺组织内的E。s浸润 基本一致。 结论：1．气道内应用抗IL－5单克隆抗体能显著抑制哮喘小鼠在吸人抗原 激发后Eos在骨臼中增殖并释放入血液循环和向支气管、肺组织中募集的过 程。2．EotaXin对EOS趋化和募集的促进作用必须依赖ths的存在。