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随着肿瘤心脏病学近几年的发展,化疗药物的心脏毒性受到广泛关注。铂类化疗药物作为目前抗肿瘤药物的主要药物,对许多恶性肿瘤均有效。目前报道的第三代铂类化疗药物奥沙利铂的不良反应主要集中在神经系统和消化系统,鉴于临床有报道奥沙利铂引起的心脏事件,故奥沙利铂的心脏毒性也不容忽视。目的:观察奥沙利铂诱导的心肌毒性,探究奥沙利铂所致心肌损伤与线粒体介导的内源性细胞凋亡的关系,并观察曲美他嗪对奥沙利铂致心肌损伤的保护作用。方法:选取ICR雄性8周龄小鼠共32只,体重20±2g,随机均分为4组:空白对照组(Control)、奥沙利铂低剂量组(L-OXL)、奥沙利铂高剂量组(H-OXL)、奥沙利铂低剂量+曲美他嗪组(L-OXL+Vasorel)。低剂量组:奥沙利铂4mg/kg腹腔注射,每周2次,连续4周给药;高剂量组:奥沙利铂8mg/kg腹腔注射,每周2次,连续4周给药。奥沙利铂低剂量+曲美他嗪组:奥沙利铂4mg/kg腹腔注射,每周2次,连续4周给药,同时曲美他嗪10mg/kg灌胃,每天1次,连续4周给药。取材前对动物麻醉进行心电图描记以及小鼠心脏超声检查,收集外周血测定肌酸激酶同工酶(CKMB)、心肌肌钙蛋白I(c Tn I)、N末端脑钠素原(NT-pro BNP)的水平,心室肌取材处理后透射电镜下观察心肌纤维及心肌线粒体结构,组织固定切片后进行HE染色、Hoechst 33258染色、Tunel染色。q RT-PCR及Western Blot测定心肌细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Cyt C、Caspase3、Caspase9、PARP表达水平。结果:1.小鼠心肌结构改变Control组可见心肌细胞排列整齐,细胞核形态大小正常;L-OXL组、L-OXL+Vasorel组与Control组比较未见明显差异;H-OXL组可见部分心肌纤维排列不规整。2.小鼠血清中心肌损伤标志物的改变与Control组相比,L-OXL组、H-OXL组、L-OXL+Vasorel组的血清c Tn I、CKMB、NT-pro BNP水平均有明显升高(P<0.05),H-OXL组升高最为明显(P<0.05),L-OXL+Vasorel组的血清c Tn I、CKMB、NT-pro BNP水平均低于L-OXL组(P<0.05)。3.小鼠心电图及超声心动图的改变组间比较未见明显心电图变化。L-OXL组、H-OXL组的LVEF、LVFS均较Control组有显著性降低(P<0.05),H-OXL组降低最为明显(P<0.05),L-OXL+Vasorel组的LVEF、LVFS较L-OXL组有显著性升高(P<0.05)。4.小鼠心肌线粒体的改变Control组心肌肌丝排列整齐,线粒体未见肿胀,嵴完整;L-OXL组可见部分线粒体出现轻度肿胀,嵴部分断裂;L-OXL+Vasorel线粒体轻度肿胀,程度较L-OXL组轻,嵴断裂数量也较L-OXL组少;H-OXL组心肌细胞肌丝排列紊乱,核周隙增宽,线粒体明显肿胀,颗粒丧失,嵴出现断裂或消失。L-OXL组、H-OXL组、L-OXL+Vasorel组的线粒体ATP含量均较Control组有明显减少(P<0.05)。并且H-OXL组的含量最少(P<0.05),L-OXL+Vasorel组的线粒体ATP含量较L-OXL组明显增加(P<0.05)。5.小鼠心肌细胞凋亡率及相关蛋白表达的改变小鼠心肌Hoechst 33258染色显示H-OXL组的细胞核碎块状致密浓染最为明显。小鼠心肌Tunel染色显示L-OXL组、H-OXL组、L-OXL+Vasorel组较Control组凋亡细胞明显增加(P<0.05),并且H-OXL组凋亡最为明显(P<0.05),L-OXL+Vasorel组较L-OXL组凋亡细胞有所减少(P<0.05)。q RT-PCR及Western Blot结果显示L-OXL组、H-OXL组、L-OXL+Vasorel组较Control组Bcl-2/Bax比值显著性降低(P<0.05),Cyt C、cleaved-Caspase3、cleaved-Caspase9、cleaved-PARP的蛋白表达水平均较Control组升高(P<0.05),其中H-OXL组表达水平最高(P<0.05)。L-OXL+Vasorel组中Cyt C、cleaved-Caspase3、cleaved-Caspase9、cleaved-PARP的蛋白表达水平均较L-OXL组降低(P<0.05)。结论:1.奥沙利铂可对小鼠心肌线粒体形态、结构产生一定的损伤,从而导致心肌线粒体功能障碍,激活了线粒体介导的内源性细胞凋亡通路,最终发生心肌细胞凋亡,产生心肌毒性。2.高剂量的奥沙利铂对小鼠心肌线粒体的结构、功能损伤更加严重,说明奥沙利铂的心肌毒性具有剂量依赖性。3.曲美他嗪可保护线粒体形态、结构和功能,对线粒体介导的内源性细胞凋亡通路具有一定的抑制作用,表现出对奥沙利铂致心肌损伤的保护作用。