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背景支气管哮喘是一种慢性非特异性的炎症性疾病,迄今为止尚无任何一种药物可以治愈儿童哮喘。有研究表明Sonichedgehog(Shh)信号通路参与哺乳动物胎肺的分化和发育,涉及到肺胚芽、呼吸道上皮细胞和血管形成,以及参与肺基质和气管软骨的分化形成等。CCL2是单核细胞趋化因子,具有促使单核细胞活化、迁移入肺成为支气管肺泡巨噬细胞等生理作用。然而在哮喘的发病过程中,Shh信号通路以及CCL2调控参与哮喘发病的细胞中分子机制尚不清楚。方法本实验主要通过应用重组人Shh蛋白干预LPS预处理对人支气管上皮细胞(HBE)株和鼠巨噬细胞(RAW264.7)株,采用Western blot和qPCR等方法来检测Shh信号通路各分子、CCL2及下游的表达情况,从而了解Shh信号通路及CCL2在细胞中的变化,以及Shh信号通路在哮喘中对CCL2表达调控机制的初步研究。结果(1)HBE细胞Shh信号通路的激活:与对照组相比,LPS预处理能够促进HBE细胞表达Shh;重组人Shh蛋白能使HBE细胞表达Shh蛋白增加、Smo、Ptch1和Gli1 mRNA表达增加。(2)RAW264.7细胞Shh信号通路的激活:与对照组相比,LPS预处理可使RAW 264.7细胞Ptch1 mRNA表达升高;重组人Shh可促进RAW 264.7细胞表达Smo mRNA下降、Ptch1和Gli1 mRNA表达增加。(3)细胞内CCL2及下游分子的表达:LPS预处理和重组人Shh蛋白都能使得HBE细胞和RAW 264.7细胞的CCL2 mRNA表达升高,同时LPS还能促进RAW 264.7细胞的CCR2 mRNA和MCPIP表达升高。结论:1.重组人Shh蛋白能够促进参与哮喘发病的HBE细胞和RAW264.7细胞中的Shh信号通路激活,并显著上调CCL2的表达;2.LPS预处理能促进重组人Shh引起HBE细胞Shh表达上调,也能促进RAW 264.7细胞Shh信号系统和CCL2信号系统表达上调。3.哮喘的发病机制可能与Shh信号通路上调CCL2的表达有关。