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研究目的： 1．采用新的化学处理方法清除大鼠胫神经和兔腓神经中的细胞和髓鞘、保留基底膜，萃取长段的神经支架。 2．观察化学萃取异体神经支架修复大鼠面神经缺损后近期神经再生的情况。 3．观察化学萃取异体神经支架修复神经缺损Schwann细胞的变化情况。 4．探索化学萃取神经支架用于异种移植，桥接面神经缺损的可行性。 方法： 1．切取10只大鼠胫神经和10只兔腓神经，以Triton X-100溶液和脱氧胆酸钠溶液按一定浓度和程序进行化学处理。萃取神经及新鲜神经行HE染色、Luxol fast blue髓鞘染色，以观察细胞、髓鞘；S100和Laminin免疫组织化学染色以显示Schwann细胞及其基底板层；毛细血管碱性磷酸酶化学染色以显示毛细血管内皮细胞。 2．60只大鼠随机分成三组：A组—自体胫神经移植组，B组—化学萃取异体胫神经移植组和C组—新鲜异体胫神经移植组，每组20只。大鼠一侧面神经下颌缘支缺损6mm的模型，以上述三种移植物桥接修复。术后5个月通过神经电生理、HRP逆行示踪、再生神经纤维的HE染色、Luxol fast blue髓鞘染色、免疫组织化学染色、美蓝染色及透射电镜等检测手段观察其效果。 3．50只大鼠随机分为五组：D、E、F、G、H，每组10只，均行化学萃取异体神经移植修复面神经缺损。分别于术后1周、10天、2周、4周和8周取材，行移植段及其近、远段的S100蛋白免疫组织化学染色。 4．120只大鼠随机分为6组：I组—自体神经移植实验组，J组—新鲜异种神经郑州大学2004届博士研究生毕业论文第一章化学萃取神经支架修复面神经缺损的实验研究支架移植实验组，K组一预变1周异种神经支架移植实验组，L组一预变2周异种神经支架移植实验组，M组一预变3周异种神经支架移植实验组，N组一异种神经移植实验组，每组20只。大鼠一侧面神经下领缘支缺损6mm的模型，以上述六种移植物桥接修复。术后5个月通过神经电生理、HRP逆行示踪、再生神经纤维美蓝染色及透射电镜等检测手段观察其效果。结果:1.去细胞神经的延展性及神经外膜的韧弹性良好。细胞和髓鞘被彻底清除，神经基底膜被保留;Schwann细胞基底板层保留完好;去细胞神经为一种无细胞、髓鞘及其碎片的中空神经基质管。2.B组在再生有髓纤维数量、直径和髓鞘厚度方面与A组相比，令人满意:移植段再生神经呈微束状分布，移植远段出现大量的有髓神经纤维，透射电镜观察见再生神经纤维具有正常的形态和结构。B组移植段有髓纤维的直径和髓鞘厚度优于A组(尸<0 .05)，而术后功能恢复、有髓纤维数量等方面的结果与A组相似 (尸>0.05)。3.移植段Schwann细胞于术后10天开始增殖，8周达高峰。移植近、远段Schwann细胞于术后1周表达增强，2周达高峰，但直至术后8周数量仍较正常神经增多;同一时间段，移植近段Schwann细胞数量多于远段。4.各异种神经支架组(J一M组)在功能方面得到部分恢复，L组最好，M组最差。在再生有髓纤维数量、直径和髓鞘厚度方面与I组相比令人满意:移植段再生神经呈微束状分布，移植远段出现大量的有髓神经纤维，透射电镜观察见再生神经纤维具有正常的形态和结构。L组有髓纤维的数量显著多于I一K、M组，而M组的数量显著少于I一L组;J一L组移植段有髓纤维的直径和髓鞘厚度优于I组(尸<0.05)，且L组又优于J、K组(尸<0.0助。而移植远段有髓纤维数量、直径和髓鞘厚度等方面的结果在I一M组间相似(尸>0.05)。结论:1.TritonX一100溶液和脱氧胆酸钠溶液化学处理方法，可有效地清除大鼠和兔周围神经中的细胞及髓鞘，萃取长段的去细胞神经;该神经支架保持了网管柱状组织结构，保留了Sehwann细胞基底膜及其laminin。2.化学萃取的神经支架作为同种异体神经移植物，在修复大鼠面神经较长段缺郑州大学2004届博士研究生毕业论文第一章化学萃取神经支架修复面神经缺损的实验研究损时不会被宿主排斥和吸收，其神经再生与自体神经移植无明显差别。这种材料极有可能成为自体神经的替代材料应用于临床面神经缺损的修复。3.化学萃取的异体神经支架能够促进和诱导宿主Schwann细胞迁移、渗透和增殖。4.化学萃取的兔胖神经支架能移植于大鼠，成功桥接面神经缺损，具有很大的临床应用潜能。2周是供体神经预变的最佳时限。