巯基氧化还原试剂对INS-1细胞株胰岛素分泌影响及其机制的研究

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目的:研究巯基氧化还原试剂对INS-1细胞株胰岛素分泌的影响及其可能的分子机制。  方法:1.传代培养胰岛素分泌细胞株大鼠细胞素瘤INS-1细胞,将其种植在24孔板上,待其生长汇合至70-80%时分组进行胰岛素分泌实验。  2.应用胰岛素放射免疫分析技术观察2,2-二硫二吡啶(DTDP)、2-2-二硫代双(DTBNP)和二硫苏糖醇(DTT)对 INS-1细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响。  3.应用胰岛素放射免疫分析技术观察DTDP、DTBNP和DTT对INS-1细胞KCl刺激的胰岛素分泌的影响。  4.应用胰岛素放射免疫分析技术分别观察硝苯地平(Nifedipine)阻断L-型CaV通道、IP3受体和二氮嗪(Diazoxide)阻断KATP通道对DTDP、DTBNP调节INS-1细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响。  5.应用胰岛素放射免疫分析技术分别观察硝苯地平(Nifedipine)阻断L-型CaV通道、IP3受体和二氮嗪(Diazoxide)阻断KATP通道对DTDP、DTBNP调节INS-1细胞KCl刺激的胰岛素分泌的影响。  结果:1.在INS-1细胞的胰岛素分泌实验中DTDP、DTBNP均能增加葡萄糖刺激的胰岛素分泌,且均可以被DTT所消除;  2.在INS-1细胞的胰岛素分泌实验中DTDP、DTBNP均能增加KCl刺激的胰岛素分泌,且均可以被DTT所消除;  3.在Nifedipine预先处理的INS-1细胞胰岛素分泌实验中DTDP、DTBNP均能增加葡萄糖刺激的胰岛素分泌,但胰岛素分泌增加幅度低于无Nifedipine处理组;4.在Diazoxide预先处理的INS-1细胞胰岛素分泌实验中DTDP、DTBNP均能增加葡萄糖刺激的胰岛素分泌,但胰岛素分泌增加幅度低于无Diazoxide处理组。  5.在Nifedipine预先处理的INS-1细胞胰岛素分泌实验中DTDP、DTBNP均能增加KCl刺激的胰岛素分泌,但胰岛素分泌增加幅度低于无Nifedipine处理组;  6.在Diazoxide预先处理的INS-1细胞胰岛素分泌实验中DTDP、DTBNP均能增加KCl刺激的胰岛素分泌,但胰岛素分泌增加幅度低于无Diazoxide处理组。  结论:1.巯基氧化还原试剂对INS-1细胞胰岛素分泌产生调节作用。  2.巯基氧化试剂对INS-1细胞胰岛素分泌调控的机制,其中可能涉及KATP通道和L-型CaV通道、IP3受体活性的调节。
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