水稻生殖发育期干旱诱导过表达的三个基因生物信息学分析以及在水稻中过表达的初步研究

来源 :上海师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:frjazz
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水稻是世界三分之一人口的主要粮食来源,是世界上最主要的粮食作物之一。水稻生产需水量非常大,而水资源的短缺严重阻碍了传统水稻的进一步发展,缺水以及干旱等条件导致水稻严重减产,干旱已成为制约水稻产量的重要因素。以往的研究无不表明,水稻生殖发育期,是水稻产量的决定期。目前,对水稻抗旱和生殖发育方面的研究也已取得了较为瞩目的成就,但对于水稻生殖发育期抗旱性方面的研究还不是很深入。因此,进行水稻生殖发育期抗旱性方面的研究极具现实意义。
  基因芯片杂交结果显示,本研究所涉及的三个基因:Os07g0670300、Os04g0670500和Os01g0633400,在其生殖发育期干旱胁迫条件下表达显著上调(由复旦大学生命科学院葛晓春副教授实验室提供)。首先,本研究对这三个基因做了相应的生物信息学分析,发现这三个基因启动子序列区域中存在与抗旱相关的顺式作用元件,如:MBS和ABRE顺式作用元件。且这三个基因编码的蛋白与植物抵御生物或非生物胁迫相关蛋白,如C2蛋白,CBS蛋白家族等具有较高的同源性。通过分析还发现,Os01g0633400基因启动子上存在可能与组织定位有关的顺式作用元件,于是对目的基因的组织定位进行分析,结果显示这三个基因分别在根、花器官和种子中表达量较高。以上研究结果对于明确目的基因及其编码蛋白的功能奠定了基础。其次,用ubi启动子引导,构建pCAMBIA1301ub i promoter+目的基因cDNA的表达载体(由葛晓春副教授实验室构建),用根癌农杆菌介导法转化“中花-11”使三个目的基因在水稻中过表达。经过筛选,最终获得13个过表达Os07g0670300基因的转化子,23个过表达Os04g0670500基因的转化子,以及14个过表达Os01g0633400基因的转化子。最后,研究分别选择三种转基因水稻植株中表达量相对较高的阳性转化子,以及非转基因对照植株,在其生殖发育阶段进行中等程度的干旱处理,观察其表型变化,并对成熟后的稻米进行农艺性状分析,研究发现,干旱胁迫处理后,三种转基因水稻的结实率与非转基因水稻相比无显著差异,百粒重比非转基因水稻略有提高,而主穗实粒数、主穗总粒数以及单株重比非转基因对照显著提高。本研究结果说明转基因水稻在干旱胁迫条件下,抗旱能力得到增强,证明这三个基因编码的蛋白可能会不同程度地提高水稻的抗旱能力。
  开展本研究,一方面验证了Os07g0670300、Os04g0670500和Os01g0633400基因的功能,获得抗旱候选基因,为利用基因工程手段改善干旱胁迫下的水稻产量提供基因资源。另一方面本研究可能能够揭示水稻逆境下生殖发育的有关机制,为进一步完善水稻整个生殖发育过程的研究做出一定的贡献。
其他文献
维生素E是一种重要的两亲性脂溶抗氧化剂,也是最重要的哺乳动物细胞膜抗氧化剂。维生素E主要在光合自养植物的叶绿体内合成,人体内的维生素E主要来自于植物源性的食物或者药物的补充。近二十年来,通过遗传学、基因组学方法及分子生物学手段,已成功鉴定与克隆模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)和蓝藻(Synechocystis.PCC6803)中维生素E生物合成通路的关键酶基因,较为详尽地
学位
学位
学位
叶绿体是植物进行光合作用的主要场所,通过光系统Ⅱ和光系统I所结合的叶绿素光和色素蛋白捕获太阳光能并转化为有机物,所以叶绿素在光和作用的捕光系统和能量转化过程中发挥着独有无可替代的的作用。水稻光和能力的强弱会直接决定水稻是否高产。若与叶绿素合成和光合作用过程相关的某一基因发生突变会影响最终的光合效率的高低。因此对叶绿素合成、叶绿体发育及光合作用相关基因的研究工作及其重要。在本研究中,调查了一个低温敏
学位
稻草是我国东部地区的主要农业废弃物,半纤维素是稻草细胞壁的主要成分。木聚糖是半纤维素的主要成分,是由木糖聚合而成的高聚物,聚合度在70~200之间,低聚木糖是半纤维素经木聚糖酶酶解后的产物。  稻草木聚糖通过碱提制备,碱提木聚糖的工艺条件为:氢氧化钠质量分数为2.5%(w/v),反应温度85℃,搅拌反应3h,固液比1:12。实验得到的醇沉木聚糖的最佳条件为:醇沉PH6,乙醇用量为3倍的溶液体积,溶
学位
学位
期刊
学位
学位