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随着中药材市场的不断发展,掺伪造假的现象并不鲜见,其中比较突出的问题是染色掺伪。目前,经调查已经发现的染色中药材、中药饮片多达几十种,掺伪染料多为非食用色素,具有过敏性和致癌性,接触或长期食用这些质量不合格的药材,会引起人体脏器的损害,现象的常见性和复杂性严重地威胁着人们的用药安全。常见检测方法如色谱、质谱及其联用技术等具有样品用量少、灵敏度高等特点,但检测时间长,且需对样品进行一定的前处理。然而,非法染色的常见性和复杂性使检测难度日益增加(尤其是现场快检)。本研究拟建立中非法染色中药材、中药饮片的纸基-SERS检测方法,并对模拟的真实样品进行检测,为现场快速鉴别提供参考。 本研究分为三个部分,主要研究内容如下:1)首先,采用浸泡法和原位还原法制备4种银胶纸,通过考察各种实验参数(考察预处理方法、银溶胶的浸泡时间及浓度对浸泡法制备银胶纸的影响;考察硝酸银的浓度对原位还原法制备银胶纸的影响)的影响,并对制备银胶纸的增强效果和保存稳定性分别进行考察,初步制得可用于纸基SERS检测法的多种纸基底;2)针对模拟单种色素染色的中药饮片,本课题先后对润湿试剂的选择与浓度、润湿/擦拭方式和时间等中药因素进行考察和优化;实现快速、无损、准确的鉴别,为初步建立纸基-擦拭-SERS快检方法提供思路;3)本课题尝试纸基-分离-SERS法对混合染料染色的中药饮片进行快速检测:先后对混合染料的色谱分离条件进行选择和优化,从色谱学和光谱学角度提高了本方法的专属性。 结果显示:1)自制的银胶纸具有较好的SERS活性和一定的稳定性,具备成为良好SERS基底的潜质,并为纸基-SERS检测法提供了基础;2)本课题选用自制的银胶纸,成功鉴别了13种低浓度染料染色的中药材、中药饮片(如灵芝、枸杞、红花、关黄柏等),检测限均低于10-6 g/mL,可以满足真实检测的需求;3)本课题实现了纸色谱与SERS的巧妙结合,该方法具有试剂消耗量低、展开时间短、短距离实现混合染料的初步分离等特点,有望应用于混合染料染色中药材的快速鉴别。 本文所建立的纸基SERS检测法具有操作简便、成本低、无需样品前处理、分析时间短、灵敏度高、专属性强等诸多特点,且无需常见染料随行对照即可实现染色中药材的快速鉴别,有望成为中药材染色掺杂现场检测的新方法。