论文部分内容阅读
背景肺癌是我国乃至全世界发病率和死亡率最高的肿瘤,其进展快、恶性程度高且极其容易转移。肿瘤产生的外泌体在肿瘤的发生、侵袭和转移方面都扮演者重要角色。表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor, EGFR)的过表达与EGFR信号通路的激活与肺腺癌的增殖、侵袭、转移、密切相关。但关于EGFR通路激活对肺腺癌产生的外泌体的影响,目前研究尚不够。目的观察表皮生长因子(Epidermal Growth Factor, EGF)刺激对肺腺癌细胞系产生的外泌体形态、粒径以及分泌量的影响,并探讨EGFR相关的促肿瘤增殖、转移作用能否能通过外泌体在肿瘤细胞间传递。方法使用EGF刺激人肺腺癌H322细胞,梯度离心法分离其细胞上清中外泌体。采用透射电镜、纳米示踪分析、Western蛋白印记以及外泌体蛋白定量方法鉴定并比较EGF刺激组与对照组所得外泌体在形态、粒径以及分泌量方面的区别。将上述两组外泌体与肺腺癌细胞共孵育后,检测肺腺癌细胞在增殖和转移方面的变化。结果梯度离心所得到的颗粒具有外泌体典型杯状的结构,颗粒直径主要分布在40-150nm之间,表达外泌体标志性蛋白CD63和TSG101。EGF处理组与对照组相比,肺腺癌产生的外泌体在形态、粒径分布无明显影响,但分泌量明显增加。两组外泌体都可促进肺腺癌细胞的增殖,但组间无统计学差异差异。而EGF处理组外泌体较对照组能提高肺腺癌的迁移能力,且具有统计学意义。结论EGF刺激对肺腺癌细胞产生的外泌体的形态和粒径影响不明显,但可促进外泌体的分泌。EGFR相关促肿瘤转移作用可能通过外泌体在肿瘤细胞间传递。