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目的:探讨水产品中常见重金属污染物铅、镉、汞、铜、锌、锰、铬、镍之间的联合毒性作用及其机制,为环境中多种重金属的联合毒性研究及评估和防治提供科学依据。 方法:基于文献对宁波地区居民水产品膳食中重金属的暴露情况进行评估,确定联合暴露比例。以此固定比例组成多元重金属混合物,采用细胞学实验,比较一元重金属及多元重金属混合物对 JB6细胞、HL7702细胞的细胞增殖活力影响(MTT法),运用毒性单位法、相加作用模型及联合作用模型对其间的联合作用进行解析;采用急性毒性试验估算八元重金属混合物-M8组的LD50,采用短期重复剂量试验,分为5%LD50剂量的M8(Pb+Cd+Hg+Ni+Cu+Zn+Mn+Cr)组,及对应的M4A(Pb+Cd+Hg+Ni)组、M5(M4A+Cr)组、M4B(Cu+Zn+Mn+Cr)组、M3(Cu+Zn+Mn)组、Cr组、Cu组、Zn组、Mn组重金属或混合物及空白对照组,每3天染毒1次,染毒5周后进行Morris水迷宫实验,检测脏器系数及各项血液学血清学指标。 结果:暴露评估表明,宁波地区居民水产品膳食重金属暴露为每天铅0.168?g/kgbw,镉0.343?g/kgbw,汞0.026?g/kgbw,铜8?g/kgbw,锌27.123?g/kgbw,锰4.444?g/kgbw,铬1.061?g/kgbw,镍0.771?g/kgbw。细胞学实验表明,单种重金属对细胞的毒性大小,JB6细胞:Hg>Cd>Cr>Zn>Pb>Cu>Mn>Ni,HL7702细胞:Hg>Cr>Cd> Cu>Zn>Ni>Mn>Pb;八元及七元混合物对细胞的毒性大小,JB6细胞:M8-Mn组>M8-Ni组>M8-Pb组>M8-Cu组>M8-Zn组>M8-Hg组>M8-Cd组>M8-Cr组>M8组,HL7702细胞:M8组>M8-Mn组>M8-Pb组>M8-Cd组>M8-Hg组>M8-Cu组=M8-Cr组=M8-Zn组>M8-Ni组;毒性单位法,相加作用模型及联合作用模型比较均表明,M8组重金属混合物主要联合作用为相加作用,七元混合物内的重金属之间主要联合作用为协同作用、相加作用及拮抗作用;在六元至二元重金属混合物中,M3CuZnMn组对 HL7702细胞的联合毒性明显表现为拮抗作用,M5组总体呈协同作用,而 M5+Cu组表现为协同作用及相加作用,M5+Mn组表现为协同作用,M5+Zn组表现为相加作用甚至拮抗作用。动物学实验表明,M4B组重金属混合物的毒性作用明显大于M8组及其他处理组,引起大鼠的体重增长延缓,脾脏、肺脏、脑及睾丸脏体系数增大,血液中性粒细胞增多,淋巴细胞减少,红细胞分布宽度和血小板参数异常,血清总胆红素、碱性磷酸酶、尿素/肌酐比例升高,血清钙离子、镁离子、铁离子浓度上升,血总胆固醇增高,血清中 T4水平、游离 T4水平升高,水迷宫探索实验大鼠中央活动时间减少,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.1)。 结论:多元重金属污染物的联合毒性是由各种重金属的单独作用及它们之间的协同作用、拮抗作用或相加作用的综合结果。本实验研究提示,Cu、Zn、Mn与其他重金属之间存在较强拮抗作用,多元重金属混合物的联合作用主要表现为相加作用,部分为协同作用或拮抗作用;多元重金属混合物可对大鼠的血液系统、凝血系统、免疫系统,肝脏及肾脏功能,血清电解质水平,脂质代谢,学习记忆能力等产生影响。因此,在进行重金属污染物联合暴露风险评估时,应考虑各种重金属之间的联合毒性;多种重金属污染物的联合毒性机制亟待进一步研究。