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目的:通过构建携带ICOS基因的腺病毒载体,高效转染小鼠MSCs后,输入aGVHD小鼠体内,观察其对小鼠aGVHD的影响,并阐明机制。方法:构建Ad5/ F11b-mICOS-EGFP腺病毒载体,转染小鼠骨髓间充质干细胞,鉴定转染前后生物学特性。建立以C57BL/6小鼠为供体、致死剂量照射的BALB/c小鼠为受体的aGVHD模型,分别用mMSC-ICOS、mMSC-EGFP、ICOS-Ig融合蛋白干预(mMSC-ICOS、mMSC-EGFP均于移植0天以2×105个经尾静脉注射,ICOS-Ig融合蛋白于移植0、2、4、8天以100ug经腹腔注射),与GVHD对照组比较,观察各组小鼠aGVHD的临床及病理表现、生存率。移植后第7、14天,取各组小鼠脾脏,流式细胞仪检测供体来源的CD4+、CD8+T淋巴细胞增殖、凋亡、CD4+CD25+T调节细胞及CD8+PD1+T调节细胞比例,移植后14天取小鼠外周血上清检测Th1、Th2、Th17相关细胞因子表达,抽提脾脏RNA,RT-PCR测定Th1、Th2相关转录因子的表达。结果:1、成功构建Ad5/ F11b-mICOS-EGFP腺病毒载体,高效转染mMSC,MOI=1000,转染后不改变mMSC的生物学特性;2、mMSC-ICOS干预可显著减轻小鼠急性GVHD的临床表现及GVHD靶组织的病理损伤,延长小鼠的生存时间。3、mMSC-ICOS干预不影响aGVHD环境中异基因T淋巴细胞的增殖和T淋巴细胞亚群的组成,也未能诱导CD4+CD25+T调节细胞或CD8+PD1+T调节细胞产生,但增加了异基因反应性T淋巴细胞凋亡。4、mMSC-ICOS干预减少了IL-2、IFN-γ、IL-17A的分泌,增加了L-4、IL-10的分泌,脾脏中GATA3、STAT6转录因子的表达增加而STAT4、T-bet转录因子表达降低。结论:mMSC-ICOS能减轻小鼠aGVHD的临床表现,减少aGVHD所致的死亡率,减轻靶器官损伤;其作用可能是通过增加移植后早期CD4+和CD8+T淋巴细胞凋亡、促使T细胞向Th2分化减少其向Th1、Th17分化实现。