慢性炎症应激因素对肝癌细胞株中microRNA-155表达及细胞增殖的影响

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目的:观察慢性炎症应激成分对肝癌细胞株中miR-155表达的变化、细胞增殖及细胞周期的变化情况,探讨慢性炎症应激因素对肝癌细胞株中microRNA-155表达及细胞增殖的影响。方法:应用miR-155特异的茎环引物、TaqMan荧光探针qRT-PCR方法检测人正常肝细胞株L02细胞暴露于H2O2等慢性炎症应激成分及未暴露于H2O2中的0h、1h、4h、8h、12h、24h的miR-155的表达量;检测人肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2细胞暴露于H2O2或SPER/NO或HU等慢性炎症应激成分及未暴露于这些药物中0h、1h、4h、8h、12h、24h的miR-155的表达量。分别对人正常肝细胞株L02细胞在加入及未加入H2O2 0 h、1 h、4 h、8 h、12 h、24h的细胞进行计数,绘制细胞生长曲线;分别对人肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2细胞中在加入H2O2或SPER/NO或HU后及未加入这些药物0 h、1 h、4 h、8 h、12 h、24h的细胞进行计数,绘制细胞生长曲线,并用流式细胞仪检测在24h时的细胞周期情况。结果:(1)在正常情况下,人正常肝细胞株L02细胞中没有检测到miR-155的表达而人肝癌细胞株SMMC-7721和HepG2细胞中检测到少量的miR-155的表达。(2)经H2O2处理后的L02细胞中的miR-155的表达量稍有升高。经H2O2或SPER/NO或HU处理后的SMMC-7721和HepG2细胞中的miR-155的表达量升高。(3)经H2O2处理后的L02细胞较未经处理的L02细胞增殖无明显加快(p>0.05);经H2O2或SPER/NO或HU处理后的SMMC-7721和HepG2细胞较未经处理的SMMC-7721和HepG2细胞增殖明显加快(p<0.05)。(4)经H2O2处理后的L02细胞,其S期比例稍上升;经H2O2或SPER/NO处理后的SMMC-7721和HepG2细胞,其S期比例上升;经HU处理后的SMMC-7721细胞,G1期比例升高,S期比例下降;而经HU处理后的HepG2细胞,在12h时G1期比例下降,S期比例升高,但随着时间的推移,S期比例逐渐下降。(5)三种药物作用于SMMC-7721及HepG2细胞后的导致的miR-155表达量升高及细胞增殖明显加快的趋势,无论在不同的药物之间还是在不同的细胞之间都未见明显差别(p>0.05)。结论:1.在正常条件下,人正常肝细胞株中不表达miR-155,而人肝癌细胞株中有少量表达。2.在慢性炎症应激因素作用下人正常肝细胞株中miR-155有微量表达。3.在慢性炎症应激因素作用下肝癌细胞株中miR-155表达量升高、肝癌细胞增殖加快及细胞周期发生改变。4.三种慢性炎症应激因素作用下的两种肝癌细胞株,上述变化无明显区别。
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