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目的:以慢性乙型病毒性肝炎/肝硬化及健康志愿者为对照组,筛查乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭( HBV-related acute-on-chronic liver failure, HBV-ACLF)患者血清的特征生物标志物,以建立其特征代谢谱,并为其发病机制研究提供参考;为鉴别诊断HBV-ACLF患者中医证型之湿热发黄证与瘀热发黄证提供可能的客观评价指标。 材料与方法:取患者及健康志愿者空腹血清共140例,其中“健康对照组”20例,HBV相关的肝炎/肝硬化组(简称“肝炎/肝硬化组”)60例(肝炎49例、肝硬化11例),乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭组(简称“肝衰竭组”)60例(湿热发黄证25例,瘀热发黄证18例,气虚瘀黄证17例)。后两组患者均为HBeAg阳性,HBVDNA>103 IU/ml,且排除其他原因导致的肝炎、肝硬化及肝衰竭,并排除其他严重全身性疾病。运用代谢组学方法,系统筛查HBV-ACLF患者的内源性代谢标志物。采用Acquity UPLC BEH C18柱(2.1×100 mm,1.7μm)色谱柱、甲醇-水为流动相,以超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)以MSn质谱模式进行样品检测。采用沃特世公司 MassLynx4.1软件中的MarkerLynx软件进行色谱峰识别,再将数据导入SIMCA-P11.5软件进行主成分分析(PCA)、偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)模式的识别分析。根据VIP值(VIP>1)、载荷图和得分图进行生物标志物的筛选,再进行t检验(P<0.05)排除没有显著性差异的化合物;根据文献并结合数据库查找相关信息物质。 结果:完成了UPLC-Q-TOF-MS的乙型病毒性肝炎、肝硬化、慢加急性肝衰竭患者及健康对照组人群血清的指纹图谱研究。在“肝衰竭组”与“肝炎/肝硬化组”间共发现了45个已知的差异性较大的代谢物(VIP>1.0);“肝衰竭组”与“健康对照组”间共发现了53个已知的差异性较大的代谢物(VIP>1.0);HBV-ACLF“湿热发黄证”与“瘀热发黄证”间共发现了26个已知的差异性较大的代谢物(VIP>1.0)。这些差异代谢物涉及胆汁酸生物合成、核黄素代谢、蛋白质代谢、磷脂代谢、糖代谢、氨基酸代谢等代谢途径以及一些信号转导通路。 结论:代谢组学可以对生物体所有低分子量代谢产物进行定性和定量分析。UPLC-Q-TOF-MS是代谢组学常用手段之一。通过研究发现,HBV-ACLF与乙型病毒性肝炎/肝硬化及健康对照人群存在显著的代谢差异,为HBV-ACLF发病机制研究提供了一定的参考依据。HBV-ACLF湿热发黄证与瘀热发黄证间的代谢图谱差异表明,不同中医证型在代谢通路上可能存在不同之处。