颗粒细胞线粒体活性与左旋肉碱水平对体外受精—胚胎移植的影响

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目的:研究颗粒细胞线粒体活性对卵子、胚胎发育及体外受精-胚胎移植结局的影响;研究左旋肉碱水平与颗粒细胞线粒体活性的相关性;探讨血浆、卵泡液左旋肉碱水平对体外受精-胚胎移植结局的影响。方法:收集2008年12月至2009年3月在我院生殖中心因输卵管性不孕行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)、有正常月经周期的患者63例(共63个周期),排除子宫内膜异位症、内分泌疾病及男性不育因素的患者。应用促性腺激素释放激素激动剂长方案超排卵,取卵日收集患者血浆和肉眼观无血染的卵泡液,应用柱前衍生-高效液相色谱法(HPLC)测定游离左旋肉碱水平。采卵同时收集患者卵泡液,密度梯度离心法分离其中的颗粒细胞,流式细胞仪法测定颗粒细胞线粒体活性。将研究对象根据治疗结果分为妊娠组和未妊娠组,比较两组血浆、卵泡液左旋肉碱水平以及卵泡液中颗粒细胞线粒体活性,分析卵泡液中颗粒细胞线粒体活性与血浆、卵泡液左旋肉碱水平的相关性,分析三者与年龄、获卵数、受精率、卵裂率、及优胚率等的相关性。结果:1.总临床妊娠率为38.98%,平均年龄为32.24±4.14,最小为24岁,最大为44岁,获卵数平均值为14,最小值1,最大值32;优胚率中位数为50%;线粒体活性平均值85.04±10.25%,最小值55.54%,最大值98.06%;血浆游离左旋肉碱水平平均值为34.23±7.74μmol/L,最小值19.95μmol/L,最大值52.93μmol/L;卵泡液游离左旋肉碱水平平均值为24.34±7.08μmol/L,最小值8.25μmol/L,最大值39.89μmol/L。2.妊娠组与未妊娠组相比,妊娠组颗粒细胞线粒体活性比未妊娠组高(89.10±7.24% vs 83.22±11.05%,P<0.05),妊娠组有较低的卵泡液左旋肉碱水平(21.33±5.83μmol/L vs 26.07±5.46μmol/L,P<0.05)和较低的血浆左旋肉碱水平(30.82±7.10μmol/L vs 35.69±7.28μmol/L,P<0.05)。3.颗粒细胞线粒体活性与年龄呈显著负相关(r=-0.449,P=0.001),与获卵数、优胚率、正常受精率成正相关(P<0.05)。4.血浆左旋肉碱水平与年龄呈显著正相关(r=0.467,P=0.002),与颗粒细胞线粒体活性成负相关((r=-0.447,P=0.012)),与获卵数成负相关(r=-0.432,P=0.005),与受精率、卵裂率、优胚率等其余IVF-ET相关参数无明显相关性。5.卵泡液左旋肉碱水平有随血浆左旋肉碱水平升高的趋势,但无显著性差异(P>0.05),卵泡液左旋肉碱浓度与正常受精率成负相关(r=-0.284,P=0.042),与年龄、获卵数、受精率优胚率等其余IVF-ET相关参数无明显相关性(P>0.05)。结论:1.颗粒细胞线粒体活性的降低可能影响卵子发育。2.颗粒细胞线粒体活性与胚胎质量有较密切的关系,可能可以作为预测胚胎质量的指标。3.颗粒细胞线粒体活性的降低可能是年长妇女IVF-ET结局较差的原因之一。4.血浆左旋肉碱水平随年龄的增长而升高。5.血浆与卵泡液中高水平的左旋肉碱浓度可能是体内氧化损伤加重的反馈。
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