液氮冷冻联合Nd:YAG激光对兔耳静脉作用的实验研究

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【目的】通过观察液氮冷冻联合Nd:YAG激光照射对兔耳背中央静脉的作用,探讨冷冻与激光联合所产生的冷热逆转效应在治疗血管畸形方面的应用价值。【方法】选用清洁级健康新西兰大白兔65只(130侧耳),随机分为A组(冷冻及激光联合组)、B组(冷冻组)、C组(激光组)、D组(空白组)四组。其中A组20只,采取液氮棉签接触法冷冻兔耳中央静脉(冻结),然后即刻采用Nd:YAG激光扫描照射静脉冻结段(能量密度为2547.8J/cm~2);B组20只,仅采取液氮棉签接触法冷冻兔耳中央静脉(冻结);C组20只,仅采用Nd:YAG激光扫描照射兔耳中央静脉(能量密度为2547.8J/cm~2);D组5只,不予任何因素干预。分别于实验处理后第1天、3天、7天、14天、21天随机选取并处死A、B、C三组白兔各4只和D组白兔1只。取兔耳背中央静脉制作组织切片,应用HE法染色,光镜观察各组静脉的组织学改变;应用免疫组化法染色,观察血管内皮细胞标记物CD31在各组静脉血管内膜表达的变化,并进行图像分析及统计学处理;将实验后第1和第3天采集的部分标本制作超薄切片,透射电镜下观察各组静脉超微结构的改变。【结果】(1)肉眼大体观察显示:A组静脉多数出现闭锁,其血液回流障碍表现比其他各组明显。(2)HE染色显示:与其他各组相比,A组静脉血管周围出血更早,其炎症反应、循环障碍及血管壁结构破坏的程度均最为严重。(3)免疫组化染色显示:在各时间段,A组静脉血管内膜的CD31阳性表达面积比始终最小,并呈持续性递减趋势,与其他各组相比存在显著性差异(p<0.05)。(4)透射电镜观察显示:A组静脉的血管内皮细胞和血管壁结构均出现破坏,同期标本破坏程度比其他各组严重。【结论】(1)与单一的液氮冷冻或Nd:YAG激光照射相比,冷冻联合激光照射能明显加重对兔耳静脉损伤并导致其闭锁,其损伤机制可能基于冷热逆转效应。(2)液氮冷冻联合Nd:YAG激光照射对表浅静脉有较好的叠加损伤作用,如果应用于临床静脉畸形的治疗,应能提高治愈率、减少治疗次数和缩短治疗时间,并能减轻对皮肤组织的损伤。
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