论文部分内容阅读
目的考察干姜、人参、白术和甘草的标志性成分对TRPV1的影响。考察干姜、人参、白术和甘草的部分标志性成分在热敏通道TRPV1上的相互影响。方法在转染TRPV1的HEK293细胞上,运用膜片钳技术测量上述成分及其配伍对跨细胞膜电流的影响。结果1.TRPV1激动剂测试在所测试的16种理中丸的标志性成分中,50μM的姜酮、6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚均可以诱导产生内向的TRPV1电流。2.10-姜酚的几个配伍关系对HEK293细胞TRPV1通道电流的影响甘草苷、人参皂苷Rb2、白术内酯均能显著延长10-姜酚诱导的TRPV1的活化时间。甘草苷能使脱敏后的TRPV1通道重新活化。3.其他配伍关系对HEK293细胞TRPV1通道电流的影响对TRPV1活化时间的影响:在辣椒素TRPV1电流存在情况下,6,8-姜酚均能缩短辣椒素诱导的TRPV1的活化时间。而姜酮、10-姜酚可以使辣椒素诱导的TRPV1活化时间延长。在人参皂苷Rb1、Rd存在条件下,后续的辣椒素诱导的TRPV1活化时间延长。对TRPV1活化峰值电流的影响:在姜酮活化TRPV1的情况下,后续的辣椒素刺激产生的新的TRPV1电流的峰值明显增高;在6,8,10-姜酚活化TRPV1的情况下,后续的辣椒素刺激产生的TRPV1电流的峰值无变化。在人参皂苷F3存在时,后续的辣椒素刺激的峰值电流明显降低。对脱敏后再刺激的反应:4种姜辣素脱敏TRPV1通道后,对后续的辣椒素再刺激均有强烈的抑制作用,体现为后续辣椒素活化TRPV1的峰值电流明显降低。通道复活效应:人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、甘草索和甘草苷均可复活TRPV1通道,使经10-姜酚或辣椒素脱敏后的TRPV1通道再次产生TRPV1电流。结论1.在所测试的16种理中丸的标志性成分中,姜酮、6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚是TRPV 1受体激动剂。2.人参皂苷Rb2、白术内酯和甘草苷均能以不同的方式延长姜的温热散寒效应。3.理中丸中标志性成分之间的交互作用对热敏通道TRPV1的脱敏时间、峰值电流、再刺激响应和通道复活存在广泛的影响,这些影响可能从细胞和分子水平阐明了理中丸的配伍意义。