解没食子酸链球菌代谢产物对结肠癌细胞生长的调控作用及其机制研究

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背景:结直肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展除与遗传因素、环境因素、饮食及生活方式有关外,与肠道微生态及微环境的改变也有密切关系。近年研究发现,牛链球菌属的解没食子酸链球菌(Streptococcus gallolyticus)与结直肠癌的发生有密切关系,但其具体机制及作用目前尚不清楚。目的:通过观察解没食子酸链球菌的代谢产物对人结肠癌细胞增殖及迁移的影响,探讨解没食子酸链球菌感染在结肠癌发生发展中的可能作用,并探讨其可能的作用机制。方法:应用无菌采样用品采样,分为空白组(A)、健康人群肠道菌群组(B)、双歧杆菌组(C)、解没食子酸链球菌组(D)和双歧杆菌+解没食子酸链球菌组(E),应用细菌代谢产物处理人结肠癌细胞SW620,采用细胞计数和CCK-8实验检测不同组别肿瘤细胞的增殖能力;用划痕实验检测不同组别肿瘤细胞的迁移能力;免疫印迹技术检测β-catenin蛋白表达变化;Real time PCR法检测WNT信号通路下游重要分子c-mycRNA的表达。结果:细胞计数结果显示,D组、E组的肿瘤细胞增殖数目相比A组、B组及C组明显增加(P值均<0.05);CCK-8实验显示D组、E组的细胞增殖活力相比A组、B组及C组明显增加(P值均<0.05);细胞迁移实验发现,D组及E组的细胞划痕恢复速度相比A组、B组及C组明显加快(P值均<0.05);免疫印迹结果显示,D组及E组WNT分子信号途径β-catenin的蛋白水平较A组、B组及C组明显升高,实时定量PCR分析显示WNT信号通路下游重要分子c-myc RNA的表达在D组及E组显著高于其他3组(P<0.05)。结论:解没食子酸链球菌可以通过其代谢产物,增强人结肠癌细胞SW620的增殖、迁移能力,提高β-catenin及c-myc的表达水平,提示其机制可能是通过激活Wnt/β-catenin信号途径,而双歧杆菌代谢产物并不能抑制解没食子酸链球菌代谢产物对结肠癌细胞的增殖和迁移能力的促进作用。
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