论文部分内容阅读
玉米(Zea mays L.)属禾本科、玉米属植物,是世界上重要的粮食作物之一,有关玉米的遗传改良研究一直是农业科学领域重要的问题,玉米的遗传改良方法也深受关注。本实验采用超声波花粉介导法获得了转GFP基因玉米,旨在考察通过该转基因方法获得材料的农艺性状及遗传稳定性,本实验主要研究内容及结果如下:1.转GFP基因玉米的获得。利用超声波辅助花粉介导转化法将带有GFP基因的质粒导入自交系‘郑58’花粉中并人工授粉,获得结实植株6株,玉米籽粒15粒,结实率为13%。经PCR检测之后,其中6株为阳性植株。以收获的15粒种子为基数,用花粉介导法所获得T1代种子的阳性率约为40%。2.对转基因玉米自交后代农艺性状的分析。T2代转基因的玉米植株的田间农艺性状的调查分析显示,在茎粗上,除了T2-6之外,其它株系同对照相比均有显著性差异;除T2-5和T2-1株系出现诸如株高和穗位高的显著差异外,T2代转基因玉米植株同非转化对照组比较,它们主要的农艺性状基本一致。3.T2代转基因玉米植株的室内考种结果显示,除了T2-4和T2-5之外,其他株系的穗长与非转化对照组相比均有显著差异;所有株系的穗粗同对照组相比也均有显著性差异;在穗行数上有显著差异的株系为T2-2,T2-5和T2-6;但除了T2-1在行粒数和干穗重上有显著差异,其它株系在各考种项目上均无显著性差异;且各株系之间不同农艺性状的差异程度不同。4.通过对大田中种植的T2代转基因玉米观察表明:T2-5株系发生了较为明显的变异,表现为:气生根部分长出了玉米穗及玉米棒与玉米茎杆之间呈现约90o的夹角。5.对T2代玉米植株GFP基因遗传规律的分析得出:T2-1、T2-5和T2-6株系中的外源基因遵循孟德尔单基因显性基因的遗传分离规律。6.由转基因玉米RT-PCR检测的结果可分析得出:在T2代各株系的阳性植株中目的基因的表达量是不相同的,且同一个株系中不同植株的表达量也是各不相同的。7.对转基因玉米western-blot的结果分析得出:在不同的转基因玉米中,GFP蛋白的表达量是不同的,且有部分转基因玉米植株GFP基因发生了沉默,无GFP蛋白的表达。