植物假蒟制剂研制及杀虫活性研究

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假药(Piper sarmentosum Roxb)为胡椒科Piperaceae,胡椒属Piper,是一种匍匐攀援生长于灌木丛、阴湿山谷、密林树丛藤本植物,广泛分布于我国南方地区。相关研究报道表明假药提取物在农业或医学领域具有良好的应用前景。为能进一步系统性研究假药提取物的杀虫活性、作用机制及活性成分在不同自然环境中的稳定性,将其在农业生产中推广使用。本文以假药植株的根茎部分为材料,采用乙醇浸泡提取后再用石油醚萃取获取杀虫活性成分粗提物,研究评价了粗提物对斜纹夜蛾、螺旋粉虱、芒果蓟马、新菠萝灰粉蚧、扶桑绵粉蚧的作用活性和对螺旋粉虱成虫体内几种常见代谢酶的活力影响;杀虫活性成分在不同环境中的稳定性以及以假药粗提物为主要成分的制剂研究。本文研究结果总结如下:1、通过室内活性测定结果表明,假药粗提物对斜纹夜蛾、螺旋粉虱、芒果蓟马、新菠萝灰粉蚧、扶桑绵粉蚧等不同试虫均具有良好的生物活性。对斜纹夜蛾2龄至6龄幼虫采用浸液法处理24h后的LCso值分别为1.398mg-mL-1、2.175mg-mL-1、3.279mg-mL-1、10.434mg-mL-1、12.816mg-mL-1对螺旋粉虱处理24h后,对若虫、蛹及成虫的LCso值分别为2.207mg-mL-1、3.330mg-mL-1和1.625mg-mL-1,且随着处理时间延长,活性增强;对芒果蓟马若虫和成虫的LC5o值分别为0.300mg·mL-1、0.478mg·mL-1;对新菠萝灰粉蚧和扶桑绵粉蚧的LC50值分别为0.821mg·mL-1、0.910mg-mL-1。2、以斜纹夜蛾3龄幼虫为指示昆虫,采用活体生测法为评价方式,通过对假蒟粗提物杀虫活性成分在不同环境中处理后对斜纹夜蛾的活性变化表明,假药粗提物杀虫活性成分对不同浓度的酸碱环境和低温环境具有很强的稳定性,但在60℃高温条件下处理10d后,部分活性成分会出现分解现象;在不同光源环境中研究结果表明,太阳光、紫外灯和日光灯对假蒟粗提物的杀虫活性影响较大,处理12h、120h后,对斜纹夜蛾3龄幼虫的触杀活性死亡率分别由80.00%、85.56%、88.89%降低为1.11%、11.11%、21.11%,太阳光照射处理的分解率高达98.61%。而在黑暗、室内自然光和节能灯照射等环境下相对稳定,其活性变化不大。根据杀虫剂受光照后的活性衰减动态,运用一级动力学模型对光照处理的活性变化情况进行拟合分析,结果得出,假蒟粗提物杀虫活性成分在太阳光、紫外光和日光灯照射处理下的衰减方程分别为C=102.309e-0.0214t、C=97.377e-0.0095t, C=93.965e-00079t,三种光源下的半衰期分别为:32.38h、72.95h、87.72h。在确定太阳光对假蒟粗提物杀虫活性影响程度的基础上,分别研究了11种不同类型的光分解抑制剂对假蒟粗提物的光分解抑制作用。结果表明,所选用的11种光分解抑制剂中,以光稳定剂622和抗氧化剂TBHQ的抑制效果为最强,经过太阳光照射处理216h后,添加两种稳定剂的处理对斜纹夜蛾的死亡率分别58.89%和54.44%,而未添加光稳定剂的基本失活;对该两种稳定剂进行不同浓度的抑制效果研究后表明,其抑制效果与浓度具有一定的相关性,光分解抑制剂的使用浓度越大,对假药提取物杀虫活性成分的光分解抑制作用效果越明显。3、经过处理螺旋粉虱成虫24h后,测定其体内几种常见代谢酶的活性变化情况,结果表明,高浓度的假蒟粗提物对螺旋粉虱成虫体内的乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶、磷酸酯酶、谷胱甘肽转移酶和多功能氧化酶均具有一定的抑制效果;其中对乙酰胆碱酯酶的抑制效果较为明显;高浓度的假药粗提物对羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶和多功能氧化酶具有一定抑制作用,但随着处理浓度的降低,反而具有一定诱导效应;对酸性磷酸酯酶和碱性磷酸酯酶的影响在各浓度之间差异不是很大。4、以农药剂型加工相关理论为指导,在活性测定和稳定性研究基础上对假蒟粗提物乳油和假药粗提物微乳剂的配制进行了较为系统研究。经过反复测定评价,成功配制出了以假药粗提物浸膏为原料的乳油制剂和微乳剂制剂,其中假蒟粗提物乳油的组成配方为:假药粗提物浸膏10%,乳化剂35%,溶剂52.5%,光稳定剂和表面活性剂2.5%;假药粗提物微乳剂的配方为:假药粗提物浸膏10%,乳化剂21%,溶剂27%,水39.5%,光稳定剂和表面活性剂2.5%。经过各项指标检测后,假蒟粗提物乳油和微乳剂两个制剂的各项指标均符合要求。对假药粗提物乳油和微乳剂的室内毒力测定结果表明,所加工的两种制剂对萝卜蚜和螺旋粉虱均具有良好的生物活性。添加光稳定剂和未添加光稳定剂的乳油对萝卜蚜的LC50值分别为:0.129mg·mL-1,0.181mg·mL-1;微乳剂的为0.233mg·mL-1,0.248mg·mL-1;添加光稳定剂的乳油、未添加光稳定剂的乳油、添加光稳定剂的微乳剂、未添加光稳定剂的微乳剂对螺旋粉虱一龄若虫的LCso值分别为:0.605、0.612、0.886、0.875mg·mL-1;对螺旋粉虱二龄若虫的LCso值分别为:0.898、0.792、0.805、0.915mg·mL-1、对螺旋粉虱三龄若虫的LCso值分别为:1.252、1.536、1.667、1.495mg·mL-1、对螺旋粉虱蛹的LCso值分别为:1.733、2.191、2.818、2.738mg·mL-1、对螺旋粉虱成虫的LCso值分别为:0.151、0.147、0.169、0.120mg·mL-1。田间药效试验表明,添加光稳定剂假药粗提物乳油在田间用量为10mg·mL-1时对萝卜蚜和螺旋粉虱成虫的施用24h的防效分别为:81.68%和77.48%;微乳剂的分别为:91.28%和88.06%,与对照药剂0.3%印楝素乳油和20%氰戊菊酯乳油防效相当。
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