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目的:精神分裂症(Schizophrenia,SZ)是一种严重危害人类健康的精神疾病,在全球范围内,人类的终生患病率高达1%。我国目前有几千万SZ患者,且每年新发病例约30万,发病率呈现愈来愈高的趋势。以利培酮(Risperidone,RIS)、喹硫平等为代表的第二代抗精神病药物的临床治疗效果要显著优于第一代抗精神病药物,故得到广泛应用。然而,利培酮、喹硫平、奥氮平等一线临床药物与患者的体重增加、胰岛素抵抗、高催乳素血症、糖尿病、高脂血症等代谢紊乱联系密切,同时也提高了心脑血管疾病如冠脉粥样硬化、脑中风的患病风险,每年将近300多万人死于各类心脑血管疾病。前期研究发现巨噬细胞迁移抑制因子(Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF)在奥氮平诱导的代谢障碍中发挥重要作用,作为第二代抗精神病药物中另一个最常用的代表药物利培酮,其在临床中常易引起代谢紊乱,本研究拟采用利培酮构建代谢紊乱动物模型,并进一步探索MIF在利培酮诱导的代谢紊乱中的作用。如果MIF亦能在利培酮诱导的代谢紊乱中起到作用,我们可以推测MIF有可能是第二代抗精神病药物引起代谢紊乱的潜在生物标志物。方法:实验1将24只清洁级6周周龄C57BL/6雌鼠随机分为三组,分别为对照组,2 mg/kg RIS组和4 mg/kg RIS组,每组8只,给药前适应一周。实验药物利培酮先溶于1μl/ml的冰醋酸,后用1 mol/ml的Na OH调节Ph至6.0,然后配置2 mg/kg RIS和4 mg/kg RIS浓度的利培酮溶液备用。给药方式:灌胃给药。每天固定时间早上9:00灌胃给药一次,其中对照组给的是不含利培酮的Na OH和冰醋酸的缓冲液。检测摄食和体重:每天固定时间早上8:00检测小鼠体重和小鼠一天的摄食量。空腹血糖检测:小鼠每周测试空腹血糖,饥饿6小时后,血糖仪测试空腹血糖。给药四周后分别进行葡萄糖耐受实验(Glucose Tolerance Test,GTT)和胰岛素耐受实验(Insulin Tolerance Test,ITT)。GTT:早上8:30撤走所有食物,空腹6小时后于下午14:30开始先检测一下其空腹血糖,测完空腹血糖之后给小鼠腹腔注射一定浓度葡萄糖,然后按照0 min、15min、30 min、60 min、90 min、120 min分别测试每个时间点的小鼠血糖浓度。ITT:早上8:30撤走所有食物,空腹4小时后,给小鼠腹腔注射1U/kg胰岛素,然后按照0 min、15 min、30 min、60 min、90 min、120 min分别测试每个时间点的小鼠血糖。做完GTT和ITT两天后,处死全部实验小鼠,取下血清、脂肪组织、下丘脑、肝脏、心脏、腓肠肌等组织放在-80℃冰箱保存。检测血清中LDL、HDL、VLDL、TG、TC、载脂蛋白B、A1(Apo B、Apo A1)、和脂肪酸等糖脂代谢指标。用ELISA试剂盒检测不给药组、2 mg/kg RIS组、4 mg/kg RIS组小鼠的血清MIF水平是否有差异。若造模成功,选出最佳浓度即对于造成小鼠代谢紊乱最为明显的浓度。实验2根据实验1的结果,4 mg/kg RIS给药1个月后,小鼠体重和摄食量增加明显,其血清MIF水平亦明显高于对照组。为进一步探究MIF是否在利培酮引起的代谢紊乱中起到了一定的作用,我们采用MIF基因敲除组和野生型小鼠,将实验小鼠分为4组,野生型小鼠+利培酮,MIF基因敲除小鼠+利培酮,野生型小鼠+溶剂,MIF基因敲除小鼠+溶剂。采用灌胃给药法,每天固定时间早上9:00灌胃给药一次,检测摄食和体重:每天固定时间早上8:00检测小鼠体重和小鼠一天的摄食量。空腹血糖检测:在给药七天后第一次测试空腹血糖,早上11点撤走笼子里面所有的食物,使小鼠饥饿6小时,下午5点开始测试空腹血糖。给药四周后分别做GTT和ITT。GTT操作方法:早上8:30撤走所有食物,空腹6小时后于下午14:30开始先检测一下其空腹血糖,测完空腹血糖之后给小鼠腹腔注射一定浓度葡萄糖,然后按照0min、15 min、30 min、60 min、90 min、120 min分别测试每个时间点的小鼠血糖浓度。ITT:早上8:30撤走所有的食物,空腹6小时后于下午14:30开始先检测一下其空腹血糖,测完空腹血糖之后给小鼠腹腔注射一定浓度的胰岛素,然后按照0 min、15 min、30 min、60 min、90 min、120 min分别测试每个时间点的小鼠血糖浓度。结果:1、4 mg/kg RIS给药组小鼠的体重、摄食量和肝脏质量明显高于对照组,并出现糖耐量升高;同时,给药组血清MIF浓度也高于对照组。2、野生型小鼠组给予利培酮后出现明显的体重和摄食增高,而MIF敲除组即使给予利培酮也未见明显的体重和摄食增加。野生型小鼠组给利培酮后其空腹血糖有增高趋势,ITT结果没有差异。结论:4 mg/kg RIS持续灌胃4周能引起雌性小鼠代谢紊乱,MIF可能在其中起到了重要作用。