落新妇化学成分及药理活性研究

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落新妇[Astilbe chinensis (Maxim.) Franch. et Sav]是虎耳草科落新妇属植物,其根入药,有止咳、清热、镇痛等功效。主要分布于中国各省及苏联、朝鲜、日本。落新妇的化学成分研究主要是对岩白菜素研究,岩白菜素作为镇咳祛痰药被收录于《中国药典》,主治慢性支气管炎,而且已有很多药品以岩白菜素为原料制成,并应用于临床。落新妇的药理活性研究表明落新妇具有抗癌、镇痛的药理作用。本论文在之前研究报道的基础上进一步研究了落新妇中岩白菜素的最佳提取工艺,并确定岩白菜素含量最高时,落新妇的最佳采收期,考察了落新妇抗氧化能力及岩白菜素的抗结肠癌作用,为深入开发此种植物资源提供了科学依据,也为扩大中药药源提供了参考价值。首先作者通过查阅国内外文献对落新妇的化学成分与药理作用进行综述,为进一步深入研究落新妇的化学成分及药理作用提供了较为详实的资料。据文献报道:岩白菜素主要存在于落新妇的根中。本论文采用HPLC法测定不同提取方法及不同提取溶剂下,落新妇根中岩白菜素的含量,经过初步提取条件的筛选,确定以乙醇为溶剂的超声提取法。然后进一步采用星点设计-效应面法优选出岩白菜素的最佳提取条件,最终确定最佳提取条件为17倍量64%乙醇超声提取三次,每次85min。该方法操作简便,提取溶剂乙醇无毒性,较水相比具有较强的穿透性,适用于工业化大量提取,成本低,安全环保。采用星点设计-效应面法优选出的最佳提取条件对落新妇根进行提取,力求最大化地将岩白菜素提取出来。然后采用国际上较为常用的萃取法,利用石油醚、乙酸乙酯、饱和正丁醇等溶剂对落新妇根提取物进行萃取,得到落新妇根的石油醚层萃取物、乙酸乙酯层萃取物、正丁醇层萃取物及水层萃取物四个不同极性部分。乙酸乙酯层进行反复硅胶柱层析分离,得到3个单体化合物,通过对其进行质谱、核磁光谱数据和理化数据的解析,并对照相关的参考文献,鉴定3个单体化合物为岩白菜素、胡萝卜苷、p-谷甾醇。本论文采用高效液相色谱法测定不同采收期的落新妇中岩白菜素含量。落新妇根中岩白菜素的含量在9月中旬以后逐渐达到积累饱和状态;并对其不同采集部位进行测定,结果表明岩白菜素主要存在于根中。本论文采用紫外-分光光度法测定落新妇不同采收期及不同部位中的黄酮及多糖的含量。结果:其根中黄酮的含量在7月份显著减少,其他月份含量变化不显著。根中总多糖含量在6月份和10月份较高,5月份和8月份较低,10月份含量最高,达23.79%。落新妇不同部位中黄酮及多糖的含量大小顺序均为根>叶>茎。本论文采用紫外-分光光度法测定落新妇根的不同极性部分在不同浓度下的抗氧化能力。结果表明:在ABTS法测定中,乙酸乙酯层的抗氧化能力最强,当浓度为0.62mg/mL时,清除率达99.40%。在DPPH法测定中,正丁醇层的抗氧化能力最强,当浓度为0.62mg/mL时,清除率达98.34%,其清除率超过VC。在还原能力测定中,乙酸乙酯层的还原性最好,当浓度为0.62mg/mL时,吸光度为2.541。总酚含量测定中,测得的乙酸乙酯层的总酚含量最高,为140.62(μg/20mg)。本论文采用MTT法观察不同浓度的岩白菜素对人结肠癌细胞株生长的影响。结果表明:不同浓度的岩白菜素具有不同程度的抑制人结肠癌细胞株SW1116的作用,并有明显的量效关系。创新点:1、星点设计-效应面法优选落新妇根中岩白菜素提取工艺,确定了最佳提取工艺2、确定了落新妇的不同极性部位抗氧化能力:落新妇根的不同极性部分对ABTS+、DPPH自由基均具有很强的清除能力,其结果与浓度呈良好的量效关系;3、确定了落新妇的最适宜的采收时期:最适宜采收时期为9月中旬。
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