【摘 要】
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石油是一种复杂的混合物,具有致畸、致癌、致突变效应,进入土壤后会导致土壤出现板结、沥青化和养分失衡。因此石油污染的修复一直是环境科学领域重要的研究问题,其中微生物修复被认为是一种相对经济和生态友好的修复方式,为此本研究旨在从石油污染土壤中分离出高效石油降解菌,优化其降解石油烃的条件;同时探讨其降解石油烃的机理;最后将其应用于石油污染土壤的修复中,为石油污染的微生物修复提供菌种资源和理论依据。主要获
【基金项目】
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国家重点研发计划“油田开采区土壤污染控制与修复技术集成示范”（编号:2019YFC1804101）
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石油是一种复杂的混合物,具有致畸、致癌、致突变效应,进入土壤后会导致土壤出现板结、沥青化和养分失衡。因此石油污染的修复一直是环境科学领域重要的研究问题,其中微生物修复被认为是一种相对经济和生态友好的修复方式,为此本研究旨在从石油污染土壤中分离出高效石油降解菌,优化其降解石油烃的条件;同时探讨其降解石油烃的机理;最后将其应用于石油污染土壤的修复中,为石油污染的微生物修复提供菌种资源和理论依据。主要获得以下结论:（1）获得了7株石油降解率大于30%的石油降解菌,选择其中三种（Acinetobacter sp.Y183,Pseudomonas sp.Y187和Bacillus sp.N47）优化其石油烃降解条件。Acinetobacter sp.Y183最适生长条件温度30℃,Na Cl含量0 g/L,p H=8,石油浓度10 g/L,最适氮源为1 g/L氯化铵;通过条件优化将其石油降解量从10天降解1.047 g提升到5天降解3.231 g。Pseudomonas sp.Y187,最适生长条件温度30℃,Na Cl含量0 g/L,p H=8,石油浓度50 g/L,最适氮源为0.5 g/L硝酸铵;通过条件优化将其石油降解量从10天降解0.912 g提升到5天降解8.987 g。Bacillus sp.N47,最适生长条件温度30℃,Na Cl含量20 g/L,p H=8,石油浓度30 g/L,最适氮源为4 g/L硝酸铵;通过条件优化将其石油降解量从10天降解1.470 g提升到5天降解2.149 g。（2）对以上三种菌株进行石油烃降解机理初步探讨,通过驱油试验发现Pseudomonas sp.Y187能产生物表面活性剂,利用薄层分析检测发现该生物表面活性剂的类型为脂肽型。通过对石油烃相关降解基因进行扩增,发现Pseudomonas sp.Y187含有环羟基化双加氧酶基因（RHDα）和苯甲酸1,2-双加氧酶基因（ben A）;Bacillus sp.N47含有烷烃加氧酶基因（alk B）和烷烃羟化酶基因（alk Bw）。而Acinetobacter sp.Y183未发现有相关降解基因。（3）选择上述三株菌,设置8个组合菌株处理,研究其对石油污染土壤中石油烃的降解能力。研究结果发现,与空白对照相比,单独添加菌株N47或者Y187均能将石油烃的降解时间由75天缩短至14天;添加复合菌株Y187和Y183,可以将石油烃的降解时间由75天缩短至30天;添加复合菌株N47和Y183,可以将石油烃的降解率从7.26%提高至9.65%综上所述,本研究获得的三株石油烃降解菌在石油污染修复中具有重要的应用价值,尤其是Pseudomonas sp.Y187和Bacillus sp.N47,具有较强的驱油能力及石油烃污染修复能力。因此,本研究为石油污染的修复提供了具有重要的菌源及理论支撑。
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