放线菌菌株M25的鉴定及其次级代谢产物活性的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:qingsong009
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以一株从土壤中分离得到的放线菌菌株M25为研究对象,综合形态特征、培养特征及16SrDNA序列分析等结果,参照《链霉菌鉴定手册》,初步鉴定放线菌菌株M25为链霉菌属中的灰红紫类群。对菌株M25的发酵制备过程进行研究,确定培养基配方为大米粉0.5%、KNO30.2%、燕麦1%、MgSO40.05%、葡萄糖0.5%、NaCl0.1%、可溶性淀粉3%、K2HPO40.1%、酵母粉0.2%、CaCO30.3%、豆饼粉0.3%的液体培养基,28℃、260rpm培养条件下发酵96h所得发酵液的抑菌活性最强。对菌株M25发酵液进行热稳定性、酸碱稳定性及光稳定性的研究,结果表明:菌株M25发酵液分别在60℃、70℃处理30min和60min,依然保持良好的抑菌活性;而在80℃处理30min后,抑菌活性大幅度降低,在90℃处理60min后活性消失;当pH在6-8的范围内抑菌活性相对稳定,抑菌圈直径基本没有变化,当pH为12时,抑菌活性明显降低;紫外和日光下连续照射9h抑菌圈直径下降幅度分别不超过9%和3%,保持了较高的抑菌活性。采用生长速率法测定菌株发酵液对供试的9种植物病原菌均有很强的抑制效果,其中对和谷镰刀菌、核盘菌、致病疫霉、辣椒疫霉、茄链格孢、褐孢霉、匍枝根霉的抑制效果最为明显,菌丝生长抑制率均达到80%以上,表明该菌株发酵液对植物病原菌具有广谱的抑制作用。采用盆栽检测法,对菌株M25发酵液进行活体药效的测定,结果表明:发酵液原液及其5倍稀释液对番茄灰霉病的防治效果分别为40.73%和20.98%。利用大孔树脂、SephadexLH-20等方法对发酵液中生物活性物质进行初步分离纯化,并用分析型高效液相色谱验证此分离纯化技术所得样品的纯度较高。
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