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在对植物单宁重要的生态功能,显著的生理学、药理学活性,对人体、家畜健康的重大影响、巨大应用价值和新用途的开发等领域的研究中,都需要对植物单宁的化学结构进行快速、简便且准确地分析。基质辅助激光解吸附离子化飞行时间(MALDI-TOF)质谱对分析多分散的植物单宁聚合物是一种理想的工具。本文着重对1)样品在MALDI过程中的裂解对准确分析单宁结构的影响,2)样品前处理过程对准确分析植物单宁结构的影响,3)MALDI-TOF质谱与13C-NMR联合应用于未知缩合单宁的结构分析等作了深入的探讨。通过本部分的研究,得到如下主要的结果:1.在MALDI过程中,水解单宁比缩合单宁更容易发生裂解。对五棓子单宁的MALDI-TOF质谱分析结果显示,在样品的MALDI过程中存在不同的阳离子化试剂会显著地影响质谱图的质量,产生不同的离子峰系列。1)Cs+作为离子化试剂能得到高质量的五棓子单宁MALDI-TOF质谱图,除了三个分子离子峰[M+Cs]+或准分子离子峰[M+2Cs-H]+和[M+3Cs-2H]+系列外,只有一个亚稳离子峰系列以很小的强度存在;2)以Na+作为离子化试剂,五棓子单宁的MALDI-TOF质谱图中除了存在三个系列的阳离子加合物分子(准分子)离子峰和亚稳离子峰,另外的两个碎片峰系列和复杂的二聚合物加合物离子峰[2M+Na]+系列在质谱图中也能被清楚地检测到;3)在不有作去离子处理的分析条件下,由分析物/基质体系中天然大量存在的Na+和K+作为阳离子化试剂。2.在缩合单宁的MALDI-TOF质谱分析中,与Na+相比,Cs+作为离子化试剂1)能检测到更高聚合度的高聚物,2)分析出的最高强度的缩合单宁聚合物的聚合度要更大,3)测定的缩合单宁平均聚合度要高于前者所得到的结果。产生这一结果的主要原因之一可能是与Cs+相比,有较多的缩合单宁聚合物分子在有Na+存在的MALDI过程中发生了裂解。在羟基模式的分析上,两种阳离子条件所获得的棓儿茶酚/表棓儿茶酚(GC/EGC)结构单元在缩合单宁中的构成比例没有显著差异。但Na+作为阳离子对缩合单宁进行MALDI-TOF质谱分析,由于实验通道中几乎不可能完全去除的K+的干扰而会高估GC/EGC的组成比例,这使得在羟基模式分析上的准确性有赖于杂质离子的去除效率,表现出较大的偶然性。在对分析物/基质(DHB)体系去杂离子的效果上,强酸性阳离子树脂要优于弱酸性的阳离子树脂。3.在对MALDI-TOF质谱图的解析中,以缩合单宁中聚合物普通的分子离子峰[M]+或聚合物的同位素簇中强度最高的峰的峰强度代表各个聚合物在MALDI-TOF质谱中的峰强度并对聚合物的分布模式、平均聚合度进行计算,会导致结果中聚合度较大的聚合物组成比例偏小,产生计算上的质量歧视。4.在植物单宁的定量分析和MALDI-TOF质谱分析中,若需要研究植物组织中单宁真实的含量和结构特征,对新鲜的植物样品用70%的丙酮进行提取、分析是值得推荐的。在通过萃取处理以除去粗提物中非单宁组分时,乙酸乙酯作为萃取溶剂对获得植物样品中缩合单宁真实的结构信息影响较大。三种纯化方法(50%甲醇去杂纯化法、纯乙醇去杂纯化法和Yb3+沉淀法)都会增大缩合单宁结构单元中棓儿茶酚/表棓儿茶酚(GC/EGC)的组成比例,但在总体上对羟基模式的影响趋势与各聚体内的趋势并不完全一致;50%甲醇去杂纯化法和纯乙醇去杂纯化法都会导致缩合单宁中高聚合度聚合物的丢失,且纯乙醇去杂纯化法还会导致低聚合度聚合物的大量丢失;纯乙醇去杂纯化法对获得植物样品中缩合单宁真实的结构信息影响最大。5.MALDI-TOF质谱与13C-NMR联合能成功地应用于对未知缩合单宁(榕树叶片缩合单宁)的结构分析。榕树叶片代谢产生的缩合单宁,在化学结构上主要属于原天竺葵定类型,且主要是原天竺葵定均聚物。该单宁中的表阿福豆素含量占所有结构单元的72.9%,阿福豆素为24.0%,儿茶素和表儿茶素总共占3.3%。榕树叶片缩合单宁的末端单元主要是表阿福豆素,仅有6.5%的阿福豆素。榕树叶片缩合单宁的平均聚合度为4.9。榕树叶片缩合单宁的小部分聚合物被酰基化和葡萄糖苷化。