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目的:(1)建立SD大鼠结膜杯状细胞(Rat Conjunctival Goblet Cells,RCj-GCs)体外常规培养模型;(2)观察黄连麦冬五种提取物干预RCj-GCs 48h的增殖活性;(3)观察有效成分配伍对RCj-GCs分别干预24h和48h的增殖活性;(4)观察有效成分配伍对RCj-GCs干预48h细胞周期的影响;(5)观察有效成分配伍对RCj-GCs干预48h细胞粘蛋白分泌的影响。方法:(1)组织块原代培养法培养细胞并用组化和免疫组化鉴定细胞;(2)将五种实验药:黄连多糖(CP)、黄连生物碱(CA)、麦冬多糖(DLP)、麦冬高异黄酮(DLI)、麦冬皂苷(DLS),分别溶解并稀释为8个实验组,终浓度分别为10g/ml、5 mg/ml、1mg/ml、0.2 mg/ml、0.04 mg/ml、0.008 mg/ml、0.0016 mg/ml、0.00032 mg/ml,通过MTT法检测8个组对RCj-GCs干预48h的增殖活性;(3)MTT法检测有效成分配伍对RCj-GCs干预24h和48h的增殖活性;(4)流式细胞仪检测配伍干预RCj-GCs48h细胞周期的变化;(5)以考马斯亮蓝G-250(CBBG)染色法检测配伍干预RCj-GCs48h细胞粘蛋白分泌量的变化。结果:(1)原代培养7-10天能够培养出RCj-GCs,经AB/PAS双染和免疫组化鉴定为RCj-GC5。(2)CP1mg/ml、DLI1mg/ml和DLP0.00032mg/ml对RCj-GCs增殖活性明显高于对照组(P<0.01)。(3)配伍各组对RCj-GCs干预24h增殖活性明显高于阴性对照组和阳性对照组(P<0.01);组Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ对RCj-GCs干预48h的增殖活性明显高于阴性对照组(P<0.01);组Ⅰ对RCj-GCs干预48h的增殖活性明显高于阳性对照组(P<0.01);组Ⅲ对RCj-GCs干预48h的增殖活性明显高于阳性对照组(P<0.05)。(4)各个配伍组均未明显促RCj-GCs凋亡;组ⅠG2/M期和组ⅢS期的细胞比例高于阴性对照组(P<0.05);组ⅠS期细胞比例高于阴性对照组(P<0.01);组ⅠG2/M期细胞比例高于阳性对照组(P<0.05)。(5)各配伍组干预RCj-GCs48h细胞粘蛋白分泌量与对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论:(1)体外成功建立RCj-GCs常规培养模型,并鉴定为RCj-GCs; (2) CP1mg/ml、DLI1mg/ml和DLP0.00032mg/ml对RCj-GCs有良好的促增殖作用;(3)配伍组Ⅰ和Ⅲ有良好的促RCj-GCs增殖的作用;(4)配伍组Ⅰ和Ⅲ能够促进细胞有丝分裂和增殖;(5)配伍各组对细胞粘蛋白的分泌无明显抑制作用。