目的观察中低温对H/R损伤后心肌细胞活力和线粒体功能的影响。检测中低温对H/R损伤后的心肌细胞中SUMO化水平的影响。探究SUMO化水平的变化对心肌细胞凋亡的影响。方法构建CoCl2和完全培养基诱导的H/R模型,33℃低温培养箱中培养H9c2和HL-1细胞来模拟低温治疗,实验分对照组、H/R组、低温治疗组,利用CCK8检测心肌细胞在三种不同的情况下的活性。流式细胞仪检测ROS产生量,共聚焦显微镜观察JC-1荧光来评估线粒体功能改变。Western印迹法检测SUMO1和SUMO2/3在各组的心肌细胞的表达水平,并检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和胱天蛋白酶-3的表达水平。构建SUMO1干涉质粒siRNA(si-SUMO1)转染H9c2和HL-1两种心肌细胞,实验分对照组、H/R组、低温治疗组、si-SUMO1组,用以上方法再次评估心肌细胞活性、细胞凋亡和线粒体功能。结果CCK8结果表明,与正常对照组相比H/R组中心肌细胞的活性显著降低。然而,低温组的细胞存活率与H/R组相比得到改善。流式细胞仪检测ROS和共聚焦显微镜观察的结果显示,与正常对照组相比,H/R组ROS产生量显著升高,线粒体膜电位显著降低,低温治疗组ROS产生量显著降低,线粒体膜电位显著升高。蛋白质免疫印迹结果显示,与对照组相比,SUMO1蛋白在H/R组的表达水平下降,但低温治疗组中的SUMO1蛋白的表达水平显著高于H/R组。同时检测了不同组之间的SUMO2/3的表达水平,但是与SUMO1蛋白的表达量不同,各组SUMO2/3蛋白的表达水平并没有显著变化。流式细胞术,蛋白质免疫印迹法和共聚焦显微镜观察结果表明通过低温治疗Bcl-2蛋白的表达和线粒体膜电位显著增加,而胱天蛋白酶3和线粒体ROS水平显著降低。当SUMO1被敲低时,线粒体ROS水平显着增加并且线粒体膜电位显着降低。这与低温保护心肌细胞的作用是相反的。结论中低温能增强心肌细胞的SUMO1表达水平并且SUMO1的高表达能够保护线粒体功能并拮抗心肌细胞的凋亡。图[5]幅;表[2]个;参[129]篇。