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随着人们对农产品质量的要求越来越高,食品安全也越来越受到重视,有机农业的发展从而成为焦点。土壤微生物作为土壤生态系统的重要组成部分,成为人们关注的焦点。施用有机肥和化肥可影响土壤中微生物的群落结构,关于肥料对土壤微生物影响的研究多在大田环境下进行,但是土壤微生物容易受气候、温度、大气等环境因素的影响,室内模拟试验可排除这些因素的影响。本试验通过室内模拟,利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)分子技术手段,研究外源有机物料对有机菜田土壤微生物的影响,以期为有机农业生产合理施肥提供理论依据。主要研究结论如下: (1)有机背景土壤处理的pH(6.78-7.01)整体高于常规背景土壤处理的pH(6.46-6.61),施入尿素可使土壤的pH下降。施入尿素和苜蓿可显著增加土壤 EC值、硝态氮含量、可溶性有机氮含量。有机背景土壤处理的微生物生物量碳、氮含量高于常规背景土壤处理,有机背景土壤加秸秆处理(OS)的微生物量氮含量显著高于其他处理。 (2)常规和有机生产系统土壤的真菌群落结构有明显差异。由DGGE图谱Shannon-Wiener多样性指数分析得知,有机生产系统土壤(O)以及加入苜蓿处理后(OA)的真菌多样性指数大于常规生产系统土壤(C)以及加入苜蓿的处理(CA),但是加入苜蓿后两者之间多样性指数的差距有缩小趋势;有机生产系统土壤加秸秆处理(OS)多样性最高。非加权组平均法(UPGMA)聚类分析将常规和有机背景土壤分为两大族群。DGGE条带测序和系统进化树表明,35个条带的近缘种大部分为非培养真菌,主要优势菌群归属为 Pyronemataceae、Pleosporaceae和Ascobolaceae。致病真菌Pleosporaceae的F9和F24条带仅存在于常规土壤,经过添加苜蓿改善后(CA),这些致病菌群条带亮度减弱。具有分解纤维素功能的Ascobolaceae真菌为有机土壤的特征性条带。 (3)常规和有机生产系统土壤的细菌群落结构有明显差异。由DGGE图谱Shannon-Wiener多样性指数分析得知,有机背景土壤处理的细菌多样性整体高于常规背景土壤处理,有机背景土壤加秸秆处理(OS)细菌多样性最高。加入尿素后细菌多样性降低,相反,加入苜蓿后细菌多样性升高。聚类分析将常规和有机背景土壤分为两大族群。系统进化树表明,30个细菌条带归属为 Proteobacteria、Acidobacteria、Actinobacteria、Firmicutes、Verrucomicrobia。常规土壤加苜蓿(CA)处理出现的特征性条带 B13与有机背景处理的共有条带 B28分别与Bacillus属和Pseudomonas假单胞菌属同源性最高,Bacillus属与Pseudomonas假单胞菌属具有防治植物病害的生防潜力。 (4)常规与有机生产背景土壤的固氮细菌群落无明显差异。由 Shannon-Wiener多样性指数分析得知,有机背景土壤加有机肥处理(OO)固氮细菌多样性最高。BLAST同源序列比对结果表明,鉴定出的固氮细菌归属于Rubrivivax红长命菌属和Rhizobiales根瘤菌目。 综上所述,土壤微生物群落在常规与有机生产背景的土壤中有显著差异,在不同的有机物料施入后,土壤微生物的多样性增加,其中施入秸秆以后土壤微生物的多样性最高。有机背景土壤的细菌多样性整体高于常规土壤。施入化肥后降低了土壤的pH,使土壤真菌多样性升高、细菌多样性降低,施加苜蓿可以起到改良土壤的作用。