鸭A-FABP和H-FABP基因cDNA序列克隆及其mRNA表达规律的研究

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脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding .proteins, FABPs)是一类分子量较小对脂肪酸有高亲和力的蛋白,在细胞内,能将其运输到脂肪酸氧化、甘油三酯或磷脂合成的部位,对脂类代谢过程有重要调控作用。本研究以家禽和哺乳动物FABP基因序列为基础,通过比较基因组学方法克隆鸭A-FABP和H-FABP基因cDNA序列;采用RT-PCR方法研究组织中A-FABP和H-FABP基因在对照组和填肥组之间mRNA表达水平差异,以及樱桃谷鸭不同生长发育时期在不同组织中的表达规律。主要结果如下:(1)填饲能显著提高樱桃谷鸭肝重、肝率、腹脂重和腹脂率(P<0.05);填饲组中血液中胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度高于对照组,但差异不显著(P>0.05)。(2)采用RT-PCR法和比较基因组法获得了鸭A-FABP和H-FABP基因cDNA序列(GeneBank Accession Number:DQ358123;DQ839646)。(3)在鸭肝脏、腿肌、脾、肺和卵巢组织中,填饲组A-FABP基因的mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05);在肌胃和腹脂中,A-FABP基因的mRNA的表达量显著低于对照组(P<0.05);在其它组织中,A-FABP基因的mRNA表达量差异不显著(P>0.05)。(4)在鸭心脏、肝脏、间脑、腿肌、肺和卵巢组织中,填饲组H-FABP基因的mRNA的表达量显著高于对照组(P<0.05);在腹脂中,填饲组H-FABP基因的mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05);而在其它组织中,H-FABP基因的mRNA表达量差异不显著(P>0.05)。(5)在鸭的生长发育过程中,各组织中A-FABP基因的mRNA表达规律不同。在间脑中一直没有表达;在肝脏中表达量没有显著变化(P>0.05);在肾脏中只在23胚龄有表达;从23胚龄到56日龄,在腺胃、小肠和肺中A-FABP基因表达量有下降的趋势,而在心脏和肌胃中,A-FABP基因表达量逐渐上升。(6)在鸭的生长发育过程中,H-FABP基因在各组织中mRNA表达规律不同。从23胚龄到56日龄,在心脏和肺(不含23胚龄时的肺组织)中表达没有显著变化(P>0.05),而在肝脏中没有表达;腺胃、小肠、间脑和腿肌中表达量有下降的趋势;在肌胃中,从23胚龄到28日龄,其表达量显著升高(P<0.05),但到56日龄时略有下降,与28日龄相比,差异不显著(P>0.05)。(7)在鸭的生长发育过程中,A-FABP和H-FABP基因在腹脂中mRNA具有相似的表达规律。从14到42日龄,其表达量有下降的趋势,在56日龄时显著升高,显著高于14、28、42日龄的表达量(P>0.05)。
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