近年来食管癌的死亡率逐渐增高，在世界恶性肿瘤死亡率中也位居前列，而我国正是食管癌的高发地区。目前恶性肿瘤的治疗方法有手术、放疗、化学治疗和免疫治疗等手段，以化学治疗为主的综合治疗在其中占有十分重要的地位。本实验选取人食管鳞状细胞癌细胞株TE-1作为研究对象来考察全合成的新型小分子化合物N-[4-（4，6二甲基-2-嘧啶氧基）-3-甲基苯基]-N-[2-（二甲氨基）]苯甲酰脲(SUD)在细胞生长、细胞周期和凋亡方面的作用，并对其凋亡相关蛋白进行了研究。实验共分为两部分:　　 第一部分:SUD对人食管鳞状细胞癌细胞株TE-1生长的抑制作用　　 目的:研究SUD对食管细胞癌细胞TE-1生长的抑制作用。　　 方法:此部分实验中采用MTT比色法、生长曲线实验、平板克隆形成实验检测SUD对食管细胞癌细胞TE-1生长的影响。采用光学显微镜观察TE-1细胞的细胞形态。　　 结果:(1)MTT实验显示SUD具有抑制肿瘤细[1]胞的生长的能力，且这种作用呈时间依赖性与浓度依赖性。SUD10-4mol/L浓度组与阳性对照药比较具有更强的抑制作用(P＜0.01)。(2)生长曲线实验结果显示，SUD能对肿瘤细胞的生长起到抑制作用。(3)平板克隆实验结果显示14天后TE-1细胞有18.00％的克隆形成率，SUD10-4mol/L，10-5mol/L和10-6mol/L药物处理组克隆形成率分别降至0.38％，5.00％和7.22％，与对照组比较具有极显著性差异(P＜0.01)。(4)普通光镜下观察到SUD处理组TE-1细胞都出现了细胞间连接的消失和膜不对称性，以及细胞皱缩等现象。　　 结论:(1)SUD可以对细胞产生时间依赖和浓度依赖性抑制，高浓度组与阳性对照药比较具有显著性差异。(2)SUD对TE-1细胞克隆形成可产生抑制作用。(3)SUD能引起TE-1形态的改变。　　 第二部分:SUD对人食管鳞状细胞癌细胞株TE-1细胞周期和凋亡的影响　　 目的:研究SUD对TE-1细胞周期和细胞凋亡的影响及相关机制。　　 方法:采用流式细胞术对TE-1的细胞周期和凋亡进行分析。采用DAP(I)染色的方法对药物诱导TE-1凋亡现象进行观察。使用AnnexinV-PI双染流式分析术对细胞的早期凋亡进行分析。westernblot检测凋亡相关蛋白对SUD的凋亡机制进行研究。　　 结果:(1)SUD10-4mol/L引起TE-1细胞的S期数量增多与相应的G1期细胞数量减少。SUD10-5mol/L和10-6mol/L药物处理组TE-1细胞的G1期数量增多，S期数量的减少。10-6mol/L药物处理组G2/M细胞数量增多。SUD可引起TE-1细胞的凋亡，与对照组相比具有显著性差异(P＜0.01)。(2)采用DAPI染色方法可以看到细胞的核固缩，染色质凝集等现象，并可观测到凋亡小体。给药作用48h后，与对照组相比中高浓度组光镜下可以观察到更多凋亡小体和典型的形态学变化。(3)对TE-1细胞加药处理48h后，高、中、低浓度SUD分别诱发了0.348±0.013，0.188±0.006和0.084±0.005的早期凋亡，均显著高于对照组(P＜0.01)。(4)SUD可以诱导凋亡抑制蛋白Bcl-2表达水平的明显下调，可引起凋亡促进蛋白Bax和p53的表达水平的上调。随着浓度的升高的凋亡促进蛋白与凋亡抑制蛋白的比值(Bax/Bcl-2)增加。药物作用48h后细胞中caspase-3、caspase-9和PARP的表达量减少，相应活化的cleavedcaspase-3、cleavedcaspase-9和cleavedPARP片段的表达上调。　　 结论:(1)SUD10-4mol/L组使TE-1的S期的细胞增多，SUD10-5mol/L和(10-6)mol/L组使TE-1的G1期细胞增多，10-6mol/L组使G2/M期细胞增多。我们初步推测可能是SUD在低浓度时首先抑制细胞暂不增殖进入G1期后不立即转入S期。(2)SUD可以诱导肿瘤细胞TE-1发生不同程度的凋亡。(3)SUD对肿瘤细胞TE-1凋亡作用机制可能是通过上调促凋亡基因p53，Bax，下调Bcl-2基因表达激活线粒体通路，从而裂解caspase-3、caspase-9为19KDa和37KDa的小分子片段，发生级联反应进而剪切活化底物PARP为89KDa的一个断裂片段，而诱导细胞凋亡的发生。