职业性慢性正己烷中毒已经成为我国当前发病率最高的职业病之一。近期的临床研究表明，NGF对于慢性正己烷中毒治疗效果显著，动物实验也证明NGF能够有效地改善慢性正己烷中毒的症状和体征。在本实验室前期工作的基础上，我们进一步研究了正己烷中毒性周围神经病的发病机制并初步探讨了外周血P0蛋白抗体作为慢性正己烷中毒性周围神经病生物标志物的可能性。　　 ⑴正己烷对血-神经屏障通透性影响的研究。为了研究正己烷对血-神经屏障通透性的影响，选用Wistar大鼠，用正已烷代谢产物2,5-HD建立中毒性周围神经病模型。模型建成后，麻醉动物，经左侧股静脉注入伊文兰染料；充分循环后，大鼠固定、坐骨神经包埋、切片，荧光显微镜下观察红色荧光在坐骨神经的分布。结果显示，中毒大鼠坐骨神经血-神经屏障通透性较对照组明显升高，且坐骨神经近端血-神经屏障通透性升高较远端明显。　　 ⑵正己烷对周围神经NGF及其受体影响的研究。为了观察2,5-HD对神经元NGF、TrkA及p75NTR的影响，采用免疫荧光技术分别观察了不同2,5-HD染毒剂量(0mM、2.5mM、5.0mM、10.0mM和20.0mM)和10.0mM2,5-HD剂量下不同染毒时间(0h、1h、3h、6h、12h、24h和48h)VSC4.1运动神经元瘤细胞VSC4.1 NGF、TrkA和p75NTR表达水平的影响。结果显示，随着2,5-HD染毒剂量的增加，VSC4.1细胞NGF表达水平明显升高，p75NTR则显著降低；在10.0mM的染毒剂量下，随着染毒时间的延长，NGF表达水平呈现明显的先增高后降低的趋势。为了观察2,5-HD对雪旺细胞NGF和p75NTR的影响，采用免疫荧光技术分别观察了不同2,5-HD染毒剂量(0mM、5.0mM、10.0mM、20.0mM和40.0mM)和10.0mM2,5-HD剂量下不同染毒时间(0h、1h、3h、6h、12h、24h和48h)，雪旺细胞NGF和p75NTR表达水平的改变。结果显示，随着2,5-HD染毒剂量的增加，雪旺细胞中NGF和p75NTR表达水平均明显升高；在10.0mM的染毒剂量下，随着染毒时间的延长，NGF和p75NTR表达水平均呈现明显的先增高后降低的趋势。为了观察2,5-HD对坐骨神经NGF、TrkA及p75NTR的影响，我们采用免疫组化和实时定量PCR技术检测了不同染毒时间(0天、7天、14天、21天和28天)Wistar大鼠坐骨神经中NGF、TrkA和p75NTR及其mRNA的水平。结果显示，随着染毒时间的延长，大鼠坐骨神经中NGF水平未观察到明显改变，TrkA水平呈现先降低后增高的趋势，而p75NTR水平则明显降低。实时定量PCR结果显示，随着染毒时间的延长，坐骨神经中NGF mRNA和TrkAmRNA水平均明显增高，p75NTR mRNA水平则呈现下降的趋势。　　 ⑶正己烷对周围神经P0蛋白和血清P0蛋白抗体影响的研究。为了观察2,5-HD对坐骨神经中P0蛋白水平的影响和血清P0蛋白抗体的检出率，我们采用免疫组化和ELISA方法，检测了不同染毒时间大鼠坐骨神经中P0蛋白水平和外周血中P0蛋白抗体的检出率；并使用职业流行病学现场资料，采用ELISA方法，检测了职业性慢性正己烷中毒患者和正己烷暴露工人血清中P0蛋白抗体的水平。结果显示随着染毒时间的延长，大鼠坐骨神经中P0蛋白水平呈现明显先降低后升高的趋势；染毒28天，大鼠外周血中P0蛋白抗体检出率较对照明显升高。流行病学研究表明，慢性正己烷中毒性周围神经病患者和正己烷暴露工人血清P0蛋白抗体检出率明显高于对照人群。　　 结论：(1)2,5-HD能够破坏血-神经屏障的结构，提高血-神经屏障的通透性。(2)2,5-HD染毒后，周围神经能够增高NGF水平，通过调控其受体TrkA和p75NTR水平发挥保护作用。(3)外周血中P0蛋白抗体与慢性正己烷暴露及其所致周围神经损伤存在一定的相关性，有可能成为慢性正己烷中毒性周围神经病的生物标志物。