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本论文主要研究致病性与非致病性副溶血弧菌在不同环境条件下生物膜的形成能力以及6种消毒剂对其生物膜的清除效果,旨在弄清副溶血弧菌生物膜的形成条件,可以有针对性地控制其在食品及环境中的形成,并筛选出可有效清除副溶血弧菌生物膜的消毒剂,为进一步优化食品工业中生物膜的控制策略提供理论依据。对从不同水产品中筛选出的非致病性副溶血弧菌和由大连疾病预防控制中心赠与的致病性副溶血弧菌进行分离鉴定。结果表明:从48份水产品中共筛选出16株副溶血弧菌,检出率为33.3%。分离出的16株副溶血弧菌用普通PCR检测显示只有tlh为阳性,tdh、trh、torRS/new和orf8均显示阴性,可判定该16株环境菌株均为非致病性副溶血弧菌。赠与的10株致病性副溶血弧菌tdh均显阳性,torRS/new显阴性,只有1株菌株含有trh基因,6株菌株含有orf8基因。可见,环境中不易筛选出携带致病因子的副溶血弧菌,tdh为临床菌株的主要致病因子。研究不同环境因素对副溶血弧菌成膜性的影响。采用结晶紫微孔板法在不同温度及培养条件下对26株副溶血弧菌的成膜性进行研究,筛选出具有形成强生物膜能力的菌株,并进一步研究盐浓度和pH对其生物膜形成的影响。结果表明:26株不同来源副溶血弧菌在不同温度及培养基条件下的成膜能力是不同的,表现出了菌株的特异性和多样性。相比较13℃,22℃更利于菌株生物膜的形成,同时,TSB中的菌株成膜性明显好于M9培养基中的菌株,E11、E17、156FR菌株形成强生物膜。因此,在后续实验中,所选择的原始培养条件为高营养的TSB培养基,温度为22℃,所选择的菌株为非致病性菌株E11、E17和致病性菌株156FR。致病性与非致病性菌株均是在NaCl浓度为1.5%-5.5%时表现出强的生物膜形成能力,当NaCl浓度在0.5%(低盐浓度)或7.5%-9.5%(高盐浓度)时,不利于生物膜的形成。最适pH值为7-8,酸性或碱性条件下均不利于生物膜的形成。研究不同培养条件下对副溶血弧菌E17与156FR的泳动能力的影响,结果表明:温度为37℃,NaCl浓度为1.5%-5.5%,pH值为7-8时副溶血弧菌有明显的泳动行为,温度、NaCl浓度和pH的过高或过低对泳动性均会有抑制作用。最后研究三大类,包括季铵盐类(苯扎氯铵),过氧化物类(二氧化氯,过氧乙酸和过氧化氢)和含氯类(二氯异氰尿酸钠和次氯酸钠)共6种消毒剂对E17与156FR生物膜的清除作用,并用扫描电镜观察消毒前后生物膜及菌体的变化。结果表明:6种消毒剂中,二氯异氰尿酸钠与次氯酸钠为最有效消毒剂,50 mg/L二氯异氰尿酸钠消毒10 min与30 mg/L次氯酸钠消毒5 min对E17和156FR的生物膜清除率分别为90.22%,93.14%,92.20%和92.31%。扫描电镜下观察到30 mg/L次氯酸钠消毒20 min后清除掉所有的生物膜,菌体干瘪并死亡。