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四溴双酚A(TBBPA)是由双酚A通过溴化等过程产生的,因其阻燃效果好、热稳定性高、制造成本低廉等优点,被大量用于工业生产和电子电器设备中。然而相关研究表明:这类化合物具有不易降解和高生物累积的特点,可对人类及野生动物造成多器官损害。因此建立一种针对此类污染物的高效可靠的分析方法,对研究其在环境中的分布、迁移及进行生态风险评估具有重要的现实意义。基于此,本研究合成了TBBPA与其衍生物四溴双酚A二羟乙基醚(TBBPA-DHEE)的系列半抗原,并以相应的半抗原为基础制备出多克隆抗体,建立了一种高通量、快速的间接竞争ELISA方法,并对相关参数进行了优化;同时,由于目前市场上还没有四溴双酚A二烯丙基醚(TBBPA-DAE)与四溴双酚A二溴丙基醚(TBBPA-DBPE),而这两种化合物作为TBBPA的重要衍生物,是进行抗体交叉反应率测定所需要的物质,因此本研究又合成了此两种物质的标准品。主要研究成果归纳如下:(1)以双酚酸为原料,通过酯化、溴化和水解等步骤得到半抗原TBBPA-D1,并通过活性酯法分别偶联在大分子载体蛋白BSA、OVA上得到了特定的人工免疫原(TBBPA-D1-BSA)和人工包被原(TBBPA-D1-OVA)。(2)以苯酚和5-乙酰戊酸为原料,通过加成、酯化、溴化和水解等步骤得到半抗原TBBPA-D2,并通过活性酯法分别偶联在大分子载体蛋白BSA、OVA上得到了特定的人工免疫原(TBBPA-D2-BSA)和人工包被原(TBBPA-D2-OVA)。(3)以TBBPA和溴乙酸为原料,通过取代等步骤得到半抗原TBBPA-DHEE-M1,并通过活性酯法分别偶联在大分子载体蛋白BSA、OVA上得到了特定的人工免疫原(DHEE-M1-BSA)和人工包被原(DHEE-M1-OVA)。(4)以TBBPA为原料,通过消去、加成等反应得到TBBPA-DAE和TBBPA-DBPE两种标准品,产物以HNMR结构鉴定。(5)以TBBPA和溴乙酸、3-溴丙酸为原料,通过加成反应等步骤得到半抗原TBBPA-D3和TBBPA-D4。(6)分别以TBBPA-D1-BSA和TBBPA-D2-BSA为免疫原免疫新西兰白兔,得到了两种多克隆抗体R1-1和R2-1。两种抗体特异性较高,对类似结构的化合物均无识别。基于R1-1所建立的ELISA方法,其IC50为73.2 ng/mL,检测限为18.53 ng/m L;利用R2-1所建立的LISA方法,其IC50为51.0 ng/m L,检测限可达12.36 ng/m L。由于R2-1的灵敏度高于R1-1,因此R2-1被应用于后期对于环境中TBBPA的相关研究(基于ELISA方法)。(7)以DHEE-M1-BSA为免疫原对新西兰白兔进行免疫,得到了一种多克隆抗体R3-2。此抗体可同时识别TBBPA-DHEE与四溴双酚A单烯丙基醚(TBBPA-MHEE),但对其他类似结构的化合物没有交叉反应。基于R3-2所建立的ELISA方法,其IC50为36.4 ng/mL,检测限为8.74 ng/m L,因此R3-2被应用于后期对于环境中TBBPA的相关研究(基于ELISA方法)。